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中喬新舟CCK-8細(xì)胞增殖/毒性檢測試劑盒(Cell Counting Kit-8)產(chǎn)品特點(diǎn):1.進(jìn)行高通量操作的同時(shí)大da簡化操作步驟,不需要進(jìn)行移液、離心或預(yù)標(biāo)記等步驟;2.通過使用試劑盒配備的stopsolution,能隨意終止顏色反應(yīng),控制實(shí)驗(yàn)條件;3.避免使用放射性同位素,保證實(shí)驗(yàn)安全性;4.具有很高的準(zhǔn)確度;5.低細(xì)胞數(shù)目(小于100個(gè)細(xì)胞/孔)檢測也能保證良好的線性范圍及靈敏度;6.使用96或384孔板進(jìn)行操作,節(jié)省實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間,能同時(shí)進(jìn)行大量樣本檢測。
優(yōu)化堿性磷酸酶活性測定以檢測PSC中的堿性磷酸酶活性,并提供用于測量干細(xì)胞未分化/分化的定量測定。人誘導(dǎo)多能干試劑盒初細(xì)胞培養(yǎng)
隨著病毒生物學(xué)的發(fā)展,種類繁多的病毒載體已越來越成為向各種實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(如細(xì)胞系、原代細(xì)胞、組織臟器等)轉(zhuǎn)運(yùn)核酸的重要工具。除了在實(shí)驗(yàn)室的組織培養(yǎng)和動(dòng)物模型生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用,它們還被用于zhi 療遺傳性疾病的臨床試驗(yàn)中。目前主流的病毒載體系統(tǒng)主要包括慢病毒(LV)、(γ-)逆轉(zhuǎn)錄病毒(RV)、腺病毒(Ad)和腺相關(guān)病毒(AAV)。我們分述之。慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科。其典型特征為其RNA基因組能逆轉(zhuǎn)錄為cDNA副本,cDNA副本又能穩(wěn)定整合至宿主細(xì)胞基因組中(這就是常說的穩(wěn)轉(zhuǎn))。逆轉(zhuǎn)錄病毒通常分兩種:簡單的(有時(shí)又稱為致ai病毒或γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒,如鼠白血病病毒)和復(fù)雜的(如慢病毒)。這些亞型間主要的差異在于復(fù)雜的逆轉(zhuǎn)錄病毒存在一些附屬基因和調(diào)控基因,而簡單的則沒有(下文有進(jìn)一步的討論)。這兩類病毒顆粒都含有兩份正鏈RNA,RNA上附有病毒反轉(zhuǎn)錄酶(RT),它們位于病毒的內(nèi)核(圖1)。位于內(nèi)核的還有結(jié)構(gòu)蛋白和酶,包括核殼(NC)、衣殼(CA)、整合酶(IN)和蛋白酶(PR)。內(nèi)核由一圈外周蛋白層包圍,外周蛋白包括基質(zhì)蛋白(MA),基質(zhì)蛋白又被來源于宿主細(xì)胞細(xì)胞膜插有包膜糖蛋白的腹膜所包圍。吉林hips試劑盒基因表達(dá)分折在用酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的時(shí)候,為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性,MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。
慢病毒(Lentivirus)是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種,它能夠?qū)谢驅(qū)氲揭恍┹^難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞等,并且將靶基因隨機(jī)整合到宿主的基因組中,從而大da增加了轉(zhuǎn)染效率,并且能夠在細(xì)胞系中穩(wěn)定表達(dá)若干代,可以進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的篩選。因?yàn)槭请S機(jī)整合,也有不確定因素,有些公司還能提供定點(diǎn)整合技術(shù),將靶基因定點(diǎn)整合到基因組特定的部位,從而保證其高效表達(dá)并且對(duì)細(xì)胞不產(chǎn)生隨機(jī)整合可能產(chǎn)生的傷害。
慢病毒表達(dá)載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質(zhì)??商峁┧械霓D(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達(dá)載體和包裝質(zhì)粒同時(shí)共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,在細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細(xì)胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細(xì)胞的感ran。
不過也有用單抗做檢測抗體的情況,尤其是在科研中。雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優(yōu)勢,但該法只適用于有多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的抗原檢測,主要用于檢測各種大分子抗原——例如在醫(yī)學(xué)檢測中測定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關(guān)的,以及在科研中檢測細(xì)胞因子等。
由于雙抗體夾心法特異性高,在檢測過程中有時(shí)會(huì)將樣本和酶標(biāo)抗體同時(shí)加入進(jìn)行反應(yīng),稱為雙抗體夾心一步法,因?yàn)椴僮鲿r(shí)間短,在商業(yè)化生產(chǎn)中有很大優(yōu)勢。
但雙抗體夾心一步法要特別注意ELISA中的鉤狀效應(yīng)(hook ffect),因?yàn)榇藭r(shí)如果樣本中抗原含量過高會(huì)導(dǎo)致其與固相抗體和酶標(biāo)抗體均有結(jié)合而無法形成“夾心復(fù)合物”,此時(shí)測出的結(jié)果將低于實(shí)際含量甚至是陰性結(jié)果。
因此,如果使用雙抗體夾心一步法測定樣本中抗原含量時(shí)要注意測量的線性范圍,另外使用高親和力的單抗也可削弱鉤狀效應(yīng)。 Hela細(xì)胞污染檢測試劑盒專為敏感、快速和pcr法檢測人培養(yǎng)細(xì)胞中hela細(xì)胞污染的簡易方法。
ELISA是一種基于酶的免疫測定方法,由于酶標(biāo)的放大作用,利用酶標(biāo)記抗體的免疫檢測,因其高特異性和敏感性而日益受到人們的青睞。細(xì)胞因子夾心ELISA是一種敏感的酶免疫分析方法,可以特異性地檢測和定量可溶性細(xì)胞因子和趨化因子蛋白的濃度。這一方法的基本原理是:①將已知抗體結(jié)合到某種固相載體表面;②加待測抗原,如兩者是特異的,則發(fā)生結(jié)合,然后把多余抗體洗除;③加入與待測抗原呈特異反應(yīng)的酶聯(lián)抗體,使形成“夾心”;④加入該酶的底物,若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生,說明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原,利用酶標(biāo)儀測其OD值。有色產(chǎn)物的量與待測抗原的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。FACS可以用于分離表達(dá)GFP的細(xì)胞和不表達(dá)GFP的細(xì)胞。人誘導(dǎo)多能干試劑盒初細(xì)胞培養(yǎng)
研究者可以利用光來檢測、測量和控制分子信號(hào)、細(xì)胞和細(xì)胞群,以便了解它們的活動(dòng)。人誘導(dǎo)多能干試劑盒初細(xì)胞培養(yǎng)
逆轉(zhuǎn)錄病毒是含有單鏈RNA基因組雙拷貝的囊膜RNA病毒。囊膜在決定宿主細(xì)胞(HC)特異性方面起著非常重要的作用。囊膜蛋白通過直接的膜融合或由囊膜糖蛋白與宿主靶細(xì)胞上的同源受體結(jié)合而促進(jìn)的受體介導(dǎo)內(nèi)吞作用,幫助細(xì)胞進(jìn)入。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是基因zhi liao和細(xì)胞zhi liao的熱門選擇,因?yàn)樗梢酝ㄟ^整合到宿主細(xì)胞基因組中,而實(shí)現(xiàn)長期穩(wěn)定的基因表達(dá)。然而,整合也存在風(fēng)險(xiǎn),整合可能導(dǎo)致插入突變,致使原ai基因上調(diào),使宿主細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(GRVV)傾向于在接近基因調(diào)節(jié)的區(qū)域整合,如轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),這比傾向于整合到基因本體中的慢病毒載體具有更高的遺傳毒性風(fēng)險(xiǎn)。γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體與慢病毒載體的另一個(gè)主要區(qū)別是,γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體優(yōu)先轉(zhuǎn)導(dǎo)分裂細(xì)胞,不能轉(zhuǎn)導(dǎo)非分裂細(xì)胞,而慢病毒載體既可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分裂細(xì)胞,也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)非分裂細(xì)胞。γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體具有簡單的基因組結(jié)構(gòu),由以下蛋白質(zhì)編碼基因組成:gag、pol和env。Gag編碼衣殼蛋白,Pol編碼病毒酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶),Env編碼囊膜蛋白。慢病毒載體有更復(fù)雜的基因組。除了gag、pol和env,HIV基因組還編碼6個(gè)額外的蛋白質(zhì):2個(gè)調(diào)節(jié)蛋白R(shí)ev和Tat以及4個(gè)輔助蛋白Vpr、Vpu、Vif和Nef。人誘導(dǎo)多能干試劑盒初細(xì)胞培養(yǎng)
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。