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源于病毒的載體系統(tǒng)作為基因遞送工具已經(jīng)在基因和細(xì)胞zhi liao領(lǐng)域應(yīng)用了多年。已經(jīng)有多種類(lèi)型的病毒載體類(lèi)型可以選擇使用,其中,基因和細(xì)胞zhi liao領(lǐng)域*常使用的是慢病毒(LV)、γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒(GRV)、腺病毒(AV)以及腺相關(guān)病毒(AAV)。分別源于小鼠白血病病毒和HIV的γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(GRVV)和慢病毒載體(LVV)是*常使用的兩種逆轉(zhuǎn)錄病毒。針對(duì)特定的應(yīng)用選擇病毒載體系統(tǒng)時(shí)需要考慮的主要因素包括zhi liao性GOI(目的基因)的負(fù)載量(插入大?。?、免疫原性、細(xì)胞趨向性和被靶細(xì)胞攝取的效率、基因表達(dá)的持續(xù)時(shí)間以及規(guī)?;a(chǎn)的簡(jiǎn)單性。Thomas等曾總結(jié)介紹過(guò)不同的病毒載體系統(tǒng),整合vs非整合、囊膜vs無(wú)囊膜、病毒DNA基因組vs病毒RNA。此外,Patel等強(qiáng)調(diào)過(guò)每種系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì),每種載體系統(tǒng)從其各自的特性來(lái)說(shuō)都是獨(dú)yi無(wú)er的,這也使其可能適合某些應(yīng)用,而不適合另一些應(yīng)用。ELISA試劑盒標(biāo)本凝集不全時(shí),血清中會(huì)殘留部分纖維蛋白原,也易造成假陽(yáng)性。伏馬素試劑盒
Cell Counting Kit-8簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),適用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)原理:WST-8屬于MTT的升級(jí)產(chǎn)品,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物(formazan)。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長(zhǎng)處測(cè)定OD值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
用途:CCK-8法應(yīng)用非常廣fan,如藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、**藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢測(cè)等。 過(guò)氧化氫酶活性分析試劑盒ScienCel已經(jīng)開(kāi)發(fā)出多種的細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,幫助您評(píng)估酶活性、代謝水平和細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)以及干細(xì)胞研究等。
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
His標(biāo)簽是當(dāng)前*流行的標(biāo)簽蛋白。His標(biāo)簽是指六個(gè)組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個(gè)標(biāo)簽的使用,一是能構(gòu)成表位利于檢測(cè);二是構(gòu)成獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征(結(jié)合配體)利于純化。其特點(diǎn)可總結(jié)為以下幾點(diǎn):1.標(biāo)簽的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分別為~26KD和~30KD,一般不影響目標(biāo)蛋白的功能;2.His標(biāo)簽融合蛋白可以在非離子型表面活性劑存在的條件下或變性條件下純化,前者在純化疏水性強(qiáng)的蛋白得到應(yīng)用,后者在純化包涵體蛋白時(shí)特別有用,用高濃度的變性劑溶解后通過(guò)金屬螯和親和層析去除雜蛋白,使復(fù)性不受其它蛋白的干擾,或進(jìn)行金屬螯和親和層析復(fù)性;3.His標(biāo)簽融合蛋白也被用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究;4.His標(biāo)簽免疫原性相對(duì)較低,可將純化的蛋白直接注射動(dòng)物進(jìn)行免疫制備抗體;5.可應(yīng)用于多種表達(dá)系統(tǒng),純化的條件溫和;6.可以和其它的親和標(biāo)簽一起構(gòu)建雙親和標(biāo)簽。純化:組氨酸殘基側(cè)鏈與固態(tài)的鎳有強(qiáng)烈的吸引力,可用于固定化金屬螯合層析(IMAC),對(duì)重組蛋白進(jìn)行分離純化。使用ELISA讀數(shù)器對(duì)溶解的甲臜產(chǎn)物進(jìn)行分光光度計(jì)量化。
1996年第yi次報(bào)道其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)是一個(gè)包含有11個(gè)β折疊的“桶”形結(jié)構(gòu),發(fā)色團(tuán)隱藏在結(jié)構(gòu)的中心,不被水溶劑猝滅。這種緊密排列的結(jié)構(gòu)對(duì)整個(gè)GFP蛋白是很重要的,它幾乎可以完全維持熒光活性;少量的斷裂是可以平衡的,少量的點(diǎn)突變也是可以接受的。與當(dāng)時(shí)的傳統(tǒng)熒光染料相比,GFP的主要優(yōu)勢(shì)在于它無(wú)毒,并且可以在活細(xì)胞中表達(dá),從而能夠用于研究動(dòng)態(tài)的生理過(guò)程。
幾乎就在它的序列被闡明的同時(shí),科學(xué)家們就開(kāi)始通過(guò)誘導(dǎo)突變來(lái)設(shè)計(jì)新的綠色熒光蛋白版本。1995年,RogerY.Tsien描述了一個(gè)S65T點(diǎn)突變,該突變?cè)黾恿薌FP的熒光強(qiáng)度和光穩(wěn)定性。這也使其主激發(fā)峰從395nm轉(zhuǎn)移到488nm,有效地改善了野生型蛋白的缺陷,促進(jìn)了其在研究中的廣泛應(yīng)用。自那以后,許多其他的突變被引入到綠色熒光蛋白中,新的熒光團(tuán)迭代不斷地被設(shè)計(jì)出來(lái)。 CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度。外泌體檢測(cè)鑒定
WST-1在代謝活性細(xì)胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,允許直接和用戶(hù)友好的細(xì)胞活力和增殖的比色測(cè)量。伏馬素試劑盒
CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高,操作簡(jiǎn)便,使用安全,重現(xiàn)性好的細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無(wú)需有機(jī)溶劑和放射性同位素,步驟少,無(wú)損失,結(jié)果準(zhǔn)確!本試劑盒檢測(cè)非常便捷。試劑盒jin一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無(wú)須再進(jìn)行任何配制等操作 。無(wú)須使用同位素,所有的檢測(cè)步驟jin在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測(cè)。1. MTT實(shí)驗(yàn)生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解;而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,不僅省去了溶解的步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來(lái)的誤差。2. 與MTT方法相比,本方法線(xiàn)性范圍更寬,靈敏度更高。本方法對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)多次測(cè)定從而找到*佳測(cè)定時(shí)間。3. 本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)效果重復(fù)性好。4. MTT具有毒性,同時(shí)其生成的甲臜需要有機(jī)溶劑溶解,會(huì)對(duì)操作人員身體造成危害。本試劑無(wú)毒,使用中無(wú)需有機(jī)溶劑,操作更加安全。5. 本試劑盒在4℃避光可長(zhǎng)期保存,使用無(wú)需配制,即開(kāi)即用。6. 酚紅和血清對(duì)CCK法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾(扣除空白孔即可)伏馬素試劑盒
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類(lèi)豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。