原代肝細胞是一種來源于肝臟組織的細胞,具有很高的生物學活性和穩(wěn)定性,是進行肝臟相關研究的重要材料。我們公司的原代肝細胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術,能夠保持細胞的原始性,具有很高的可再生性和穩(wěn)定性,可以廣泛應用于肝臟疾病的研究和藥物篩選。我們的原代肝細胞產(chǎn)品采用關鍵技術的培養(yǎng)方法,能夠保證細胞的生長和分化,同時不會影響細胞的穩(wěn)定性和功能。我們的產(chǎn)品具有以下特點:1.高質(zhì)量:我們的原代肝細胞產(chǎn)品來源于健康的人體肝臟組織,具有很高的生物學活性和穩(wěn)定性,可以保證研究結(jié)果的準確性和可靠性。2.易于培養(yǎng):我們的原代肝細胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術,能夠保持細胞的原始性,同時不需要復雜的培養(yǎng)條件,可以方便地進行培養(yǎng)和擴增。3.廣泛應用:我們的原代肝細胞產(chǎn)品可以廣泛應用于肝臟疾病的研究和藥物篩選,例如肝病、肝纖維化、肝炎等疾病的相關研究,以及藥物代謝和毒性研究等領域。4.高效:我們的原代肝細胞產(chǎn)品具有很高的可再生性和穩(wěn)定性,可以進行多次傳代和擴增,能夠較大提高研究效率和成本效益??傊?,我們的原代肝細胞產(chǎn)品是一種高質(zhì)量、易于培養(yǎng)、廣泛應用、高效的研究材料,能夠為肝臟相關研究和藥物篩選提供有力的支持。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)輔助試劑,包括細胞復蘇、鋪板、維持培養(yǎng)基和培養(yǎng)酶等。猴原代肝細胞圖片
原代肝細胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動物肝臟中分離原代肝細胞,用來體外培養(yǎng)并進行研究。使用較多的是嚙齒動物,還有一些哺乳動物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細胞除了供體品系不同以外,也會根據(jù)細胞來源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實驗的研究目的。 原代肝細胞的應用場景也很多。隨著技術水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學的研究;②預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細胞毒性等。廣州人原代肝細胞培養(yǎng)方法原代肝細胞擁有肝臟的特性和功能,可以用于研究肝臟疾病的細胞信號傳導和細胞增殖,是有效的體外實驗模型。
解決人工肝臟合成難題,原代肝細胞是理想的肝細胞源。目前,常用的肝細胞源有人原代肝細胞、動物原代肝細胞、liver cancer細胞系HepG2、HepaRG、永生化細胞以及干細胞等。其中,人原代肝細胞是理想的肝細胞源,因為它們具有完整的肝功能和生理特性,能夠更好地模擬人體肝臟的生理狀態(tài)。但是,由于人原代肝細胞的獲取和保存非常困難,且存在批次差異和有限的增殖能力,因此在實際應用中受到了一定的限制。 相比之下,動物原代肝細胞則具有更好的增殖能力和更便捷的獲取方式,但是由于動物肝臟與人肝存在一定的差異,因此其在模擬人體肝臟生理狀態(tài)方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG則是常用的liver cancer細胞系,它們具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性,但是存在致瘤風險,因此在臨床應用中需要謹慎使用。 永生化細胞則是通過基因工程技術將原代肝細胞轉(zhuǎn)化為無限增殖的細胞系,如HepG2.2.15和Huh7等。這些細胞系具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性,但是存在一定的局限性和風險。 綜上所述,原代肝細胞是理想的肝細胞源,選擇合適的肝細胞源需要綜合考慮其功能、增殖能力、安全性等因素,以期達到想要的生物人工肝效果。
原代肝細胞是藥物的毒性研究的重要組成部分。藥物通過肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細胞即為一個較好的篩選模型,尤其是在檢測結(jié)構相關化合物時,原代肝細胞的角色更為重要。 人原代肝細胞是重要的體外模型。人原代肝細胞在較大程度上保留了細胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細胞極其相似,是較為接近臨床的一種標準體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時進行研究或者凍存待用。 原代肝細胞是肝臟疾病的研究以及相應藥物的開發(fā)的重要載體。比如一些對于乙肝病毒的研究需要對肝細胞進行體外培養(yǎng);一些嚴重肝臟疾病的細胞移植研究也要涉及到對原代肝細胞進行大量擴增。因此,原代肝細胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來科學家們關注的熱點。人原代肝細胞保留了細胞在體內(nèi)環(huán)境里的功能與特性,是較為接近臨床的一種標準體外短期培養(yǎng)模型。
原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長,生存空間大,允許長時間生長,便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當細胞數(shù)量達到一定密度后,由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱為密度抑制。 當肝細胞被分離后,可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內(nèi)細胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致,隨時間的延長而迅速下降,故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復過來,保持了正常肝細胞的生物學特征及代謝活性,一般用于酶誘導研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。提高原代肝細胞的活率需要綜合考慮多個因素:細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。珠海豬原代肝細胞貼壁
立沃生物的原代肝細胞的分離技術門檻很高,需要特定的實驗室條件和技術,嚴格的實驗室管理和質(zhì)量控制。猴原代肝細胞圖片
不同物種的原代肝細胞在貼壁時間上存在差異。以小鼠為例,其原代肝細胞可能在培養(yǎng)基中需1個小時開始貼壁,而其他物種則需要4-6小時左右。這是由于不同物種的細胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,貼壁時間是一個重要的指標。一般來說,原代肝細胞在培養(yǎng)基中貼壁后,細胞的代謝活性和功能會得到提高,因此貼壁時間越短,細胞的生物學活性就越高。但是,如果貼壁時間過短,細胞可能會出現(xiàn)脫落或死亡等情況,因此需要根據(jù)具體情況進行調(diào)整。 另外,原代肝細胞的貼壁能力也與細胞的新鮮程度有關。新鮮分離的原代肝細胞一般需要4-6小時才能貼壁,而經(jīng)過冷凍保存的細胞則需要更長的時間。因此,在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)細胞的新鮮程度和貼壁時間進行合理的調(diào)整。 需要注意的是,幾乎所有物種的原代肝細胞都可以貼壁,但不同物種的細胞在培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基配方等方面存在差異。因此,在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)具體物種和實驗要求進行合理的選擇和調(diào)整,以確保細胞的生物學活性和代謝功能得到有效的發(fā)揮。猴原代肝細胞圖片