GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定
分析步驟5.1試樣處理準(zhǔn)確稱取5g(精確0.0001g)混合均勻的試樣于燒杯中,用30mL40℃溫水溶解,轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中。加入10mL13%高氯酸溶液,混合均勻后靜止20min。用蒸餾水定容至刻度,混勻,用定量濾紙過濾。取濾液20mL,用4mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)pH為12.5~13.0后,置于40?C水浴60min。冷卻后用13%高氯酸調(diào)pH為7.0~7.5。將樣液轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中,用蒸餾水定容?;靹蚝笾糜?℃冰箱中過夜。將試樣處理液從冰箱中取出放置至室溫,取上清液用0.45μm濾膜過濾后備用。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測(cè)定用的公司,價(jià)格實(shí)惠,有想法可以來我司咨詢!維生素BT測(cè)定用左旋肉堿測(cè)定用試劑左旋肉堿
法驗(yàn)證參數(shù)
線性和線性范圍左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度為80μg/mL。吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液定容到25mL,經(jīng)過計(jì)算,該系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中左旋肉堿的質(zhì)量濃度分別為1.6μg/mL、3.2μg/mL、6.4μg/mL、9.6μg/mL、16μg/mL。以左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程結(jié)果見表1。2.2檢出限和定量限左旋肉堿的檢出限采用空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法評(píng)估,即通過分析大量(n≥10)樣品空白確定檢出限(LOD)。本次實(shí)驗(yàn)通過10次樣品空白**測(cè)試,計(jì)算出檢測(cè)結(jié)果的算數(shù)平均值(X)和標(biāo)準(zhǔn)偏差(S)確定檢出限(LOD)。計(jì)算公式如下:LOD=X+3S上式中:LOD為方法檢出限(mg/100g);X為10次**空白平均值;S為10次**空白標(biāo)準(zhǔn)偏差。定量限(LOQ)的確定主要是從其可信性考慮,為了增加數(shù)據(jù)的可信性,將10倍的檢出限作為本檢驗(yàn)方法的定量限。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。當(dāng)樣品稱樣量為5.0000g時(shí),該方法的檢出限為0.187mg/100g,定量限為1.87mg/100g。 黑龍江左旋肉堿測(cè)定用左旋肉堿測(cè)定用試劑左旋肉堿上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司為您提供 左旋肉堿測(cè)定用服務(wù),價(jià)格實(shí)惠,歡迎您的來電哦!
GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定
酶技術(shù)法酶技術(shù)法是目前測(cè)定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術(shù)的分光光度法、放射酶法、自動(dòng)分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法,是目前測(cè)定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測(cè)了小鼠組織中的游離肉堿后經(jīng)進(jìn)一步完善成為現(xiàn)在的方法。該方法的機(jī)理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng)生成黃色物質(zhì)其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系,通過分光光度法測(cè)定COASH生成量即可間接測(cè)定左旋肉堿的含量。該方法操作經(jīng)濟(jì)、快捷,且該方法中催化全CAT酶對(duì)于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應(yīng)具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復(fù)性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學(xué)法(通過比色法測(cè)定肉堿和澳酚藍(lán)反應(yīng)生成的有色物質(zhì)來測(cè)定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質(zhì)的影響。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定》中使用的便是此方法。
乙酰輔酶A含量計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y=1640x+0.012;x為吸光值,y為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(nmol/mL)。注意:本試劑盒比較低檢測(cè)限為1.6nmol/mL。(1)按照蛋白濃度計(jì)算乙酰輔酶A含量(nmol/mgprot)=[(1640×ΔA+0.012)×V1]÷(V1×Cpr)=(1640×ΔA+0.012)÷Cpr需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算乙酰輔酶A含量(nmol/g鮮重)=[(1640×ΔA+0.012)×V1]÷(W×V1÷V2)=(1640×ΔA+0.012)÷W(3)按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:乙酰輔酶A含量(nmol/104)=[(1640×ΔA+0.012)×V1]÷(500×V1÷V2)=(1640×ΔA+0.012)÷500V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mL;V2:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬。上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測(cè)定用,有想法可以來我司咨詢!
250083 5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoicacid) 69-78-3 99%5g/25g
250022 N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES 7365-45-9 >99.0% 25G/100g
280033 乙酰輔酶AAcetylCoenzymeA(Acetyl-CoA)Tri-Li 20mg,50mg,200mg
Formula:C23H35N7O17P3SLi3
Molecularweight:acetyl-CoA:Mr=809.6,acetyl-CoA-Li3:Mr=827.4
QualityPurity:85%acetyl-CoA(enzymaticandabsorbance),2%Li
230057乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶5mg/1ml
Specificactivity:approx.80U/mgat 25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5 左旋肉堿測(cè)定用,就選上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司,讓您滿意,歡迎新老客戶來電!上海GB29989用左旋肉堿測(cè)定用試劑L肉堿
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嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定
配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制濃度為80g/mL的左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:將左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)品在(102±2)℃的烘箱中烘干2h后冷卻至室溫,稱取20mg(精確至0.1mg)放入小燒杯中,用三級(jí)水溶解放入250mL容量瓶中并定容搖勻。配制左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液放入25mL的容量瓶中,用三級(jí)水定容混勻。注意現(xiàn)用現(xiàn)配。1.3儀器和設(shè)備分析天平(型號(hào):AL207-IC):購于梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司,感量為0.1mg;pH計(jì)(型號(hào):PB-10):購于賽多利儀器(北京)有限公司,精度為0.01;離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥1500r/min;恒溫水浴鍋:溫度可控制在(40±2)℃;分光光度計(jì)(型號(hào):TU-1901)。 維生素BT測(cè)定用左旋肉堿測(cè)定用試劑左旋肉堿