乙酰輔酶A的提取1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。測(cè)定步驟1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min，用蒸餾水于340nm處調(diào)零。2、取920μL工作液和100μL樣本至1mL石英比色皿，混勻，立即記錄340nm處20s的吸光值A(chǔ)1和80s時(shí)的吸光值A(chǔ)2，計(jì)算ΔA=A2-A1上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測(cè)定用，期待您的光臨！江西乳品用左旋肉堿測(cè)定用試劑維生素BT

GB29989食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定

范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定。

原理試樣經(jīng)過(guò)水提取，用高氯酸沉淀蛋白質(zhì)后過(guò)濾。濾液經(jīng)堿皂化后使溶液中結(jié)合態(tài)的左旋肉堿游離出來(lái)。左旋肉堿與乙酰輔酶A在乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶的催化下反應(yīng)生成乙酰肉堿和游離的輔酶A。游離的輔酶A和2-硝基苯甲酸反應(yīng)生成黃色物質(zhì)，其顏色深淺與游離的輔酶A含量成正比。因游離的輔酶A與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系，可間接求出試樣中左旋肉堿含量。

試劑和材料注：除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水。

試劑 高氯酸(HClO4)。 氫氧化鈉(NaOH)。氫氧化鉀(KOH)。 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。 N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。 乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2Na2·2H2O）。 乙酰輔酶A（AcetylCoA）：在2℃~8℃保存。 乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)：在2℃~8℃保存。 安徽GB29989用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰輔酶A上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測(cè)定用，價(jià)格實(shí)惠，有想法可以來(lái)我司咨詢！

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定

酶技術(shù)法

該方法也有不足,由于DTNB 還能與待測(cè)樣品中其他的硫醇類(-SH)物質(zhì)起反應(yīng)DTNB與CoASH不能完全反應(yīng),從而影響測(cè)定的準(zhǔn)確度。因此為了消除-SH物質(zhì)的干擾Marquis 在測(cè)定前將樣品置于90CpH85的環(huán)境中處理5min;也有人用H20，化樣品中含硫醇基的物質(zhì)8(2)2-酮戊二酸脫酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)對(duì)原方法進(jìn)行改進(jìn),在測(cè)定游離輔酶A時(shí)用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脫酶(OGDH)催化下與COASH反應(yīng)生產(chǎn)珀酷輔酶A和還原型輔酶I(NADH)NADH在340m 處有強(qiáng)吸收。與原方法相比，OCDH與 COASH反應(yīng)的專一性更強(qiáng)，反應(yīng)更加完全,且不受其他-SH 的影響。該方法靈敏度高至nmol級(jí)，肉堿回收率在103%~115%之間適合低肉堿含量的樣品。

乙酰輔酶A（Acetyl-CoA）含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)分光光度法25管/24樣正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義乙酰輔酶A***存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。是生物體能源物質(zhì)代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種重要的中間代謝產(chǎn)物。在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個(gè)樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過(guò)乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，經(jīng)過(guò)這條通路徹底氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP合成。此外，乙酰輔酶A是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。測(cè)定原理蘋(píng)果酸脫氫酶可催化蘋(píng)果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋(píng)果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯(lián)反應(yīng)，乙酰輔酶A含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反應(yīng)了乙酰輔酶A含量的高低。上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司為您提供 左旋肉堿測(cè)定用服務(wù)，價(jià)格實(shí)惠，歡迎您的來(lái)電哦！

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定

酶技術(shù)法酶技術(shù)法是目前測(cè)定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術(shù)的分光光度法、放射酶法、自動(dòng)分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法，是目前測(cè)定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開(kāi)始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測(cè)了小鼠組織中的游離肉堿后經(jīng)進(jìn)一步完善成為現(xiàn)在的方法。該方法的機(jī)理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng)生成黃色物質(zhì)其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系,通過(guò)分光光度法測(cè)定COASH生成量即可間接測(cè)定左旋肉堿的含量。該方法操作經(jīng)濟(jì)、快捷，且該方法中催化全CAT酶對(duì)于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應(yīng)具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復(fù)性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學(xué)法(通過(guò)比色法測(cè)定肉堿和澳酚藍(lán)反應(yīng)生成的有色物質(zhì)來(lái)測(cè)定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質(zhì)的影響。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定》中使用的便是此方法。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測(cè)定用，歡迎新老客戶來(lái)電！咸陽(yáng)奶粉測(cè)定用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰輔酶A

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乙酰輔酶A用于使用放射性同位素測(cè)定細(xì)胞提取物中的CAT酶活性。細(xì)胞提取物中的CAT酶活性催化乙?；鶑囊阴］o酶A轉(zhuǎn)移到氯霉素。已經(jīng)開(kāi)發(fā)了許多測(cè)定來(lái)測(cè)量細(xì)胞提取物中的CAT活性。乙酰輔酶A也已用于測(cè)定檸檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰輔酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**終產(chǎn)物，參與Ac-CoA途徑，這是碳化合物的代謝途徑。Ac-CoA在膽固醇合成中十分重要。它還參與脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亞精胺）的分解代謝。低水平的Ac-CoA導(dǎo)致神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元功能的喪失。酮體和甘油三酯在水解時(shí)產(chǎn)生Ac-CoA，這間接導(dǎo)致組蛋白乙?；黾印Ｖ苽湔f(shuō)明工作溶液：比較好溶劑：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。儲(chǔ)存條件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸鹽緩沖液，pH7，在-15至-25℃下，可穩(wěn)定保存3周。未凍存的溶液應(yīng)立即使用。江西乳品用左旋肉堿測(cè)定用試劑維生素BT