斑馬魚(yú)功效評(píng)價(jià)體系●基于表型對(duì)斑馬魚(yú)的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察，進(jìn)而評(píng)估功效，如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過(guò)染色、試劑盒等方法對(duì)功效進(jìn)行測(cè)試，如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測(cè)等●基于分子生物學(xué)通過(guò)PCR的方法對(duì)特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量，也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實(shí)驗(yàn)●基于行為學(xué)通過(guò)對(duì)斑馬魚(yú)的運(yùn)動(dòng)情況對(duì)一些功效進(jìn)行評(píng)價(jià)，如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚(yú)安全評(píng)價(jià)體系●胚胎毒性檢測(cè)將新受精的斑馬魚(yú)胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚(yú)胚胎生長(zhǎng)發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會(huì)誘發(fā)斑馬魚(yú)胚胎毒性甚至死亡斑馬魚(yú)的神經(jīng)系統(tǒng)相對(duì)簡(jiǎn)單，便于研究神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制。斑馬魚(yú)模型基因敲除構(gòu)建方法

人類(lèi)疾病的復(fù)雜性與多樣性始終是醫(yī)學(xué)攻克的難題，斑馬魚(yú)Cdx基因卻獨(dú)具優(yōu)勢(shì)，為搭建疾病研究模型貢獻(xiàn)優(yōu)異力量，在疑難雜癥與基礎(chǔ)研究間架起一座希望之橋。先天性脊柱發(fā)育不全、腸道吸收不良等病癥，在人類(lèi)群體中雖發(fā)病率各異，但均嚴(yán)重影響生活質(zhì)量甚至危及生命，致病根源常隱匿于胚胎發(fā)育關(guān)鍵基因異常之中。斑馬魚(yú)Cdx基因功能紊亂時(shí)，恰好精細(xì)模擬出這類(lèi)疾病的典型特征：脊柱畸形扭曲、腸道結(jié)構(gòu)功能失常，恰似人類(lèi)患者病癥在微觀生物世界的“投影”?？蒲袌F(tuán)隊(duì)借此模型“利器”，抽絲剝繭剖析發(fā)病的分子“黑匣子”，鎖定潛在醫(yī)療靶點(diǎn)，篩選靶向藥物。斑馬魚(yú)基因敲除科研課題實(shí)驗(yàn)公司斑馬魚(yú)的免疫系統(tǒng)能識(shí)別和清理體內(nèi)的病原體。

人類(lèi)疾病紛繁復(fù)雜，先天性疾病、遺傳性疾病成因隱匿，攻克難度極大。斑馬魚(yú)Cdx模型宛如搭建的模擬戰(zhàn)場(chǎng)，為探尋疾病真相、研發(fā)醫(yī)療策略開(kāi)辟捷徑。不少先天性脊柱畸形、腸道發(fā)育異常病癥，禍根在于胚胎發(fā)育關(guān)鍵基因失常，斑馬魚(yú)Cdx模型精細(xì)復(fù)現(xiàn)這些病癥特征。以先天性脊柱發(fā)育不全為例，患病嬰兒脊柱彎曲變形，生活飽受困擾。在斑馬魚(yú)Cdx模型中，當(dāng)Cdx基因發(fā)生突變，幼魚(yú)脊柱同樣出現(xiàn)怪異彎曲，解剖學(xué)與影像學(xué)觀察可精細(xì)捕捉病變細(xì)節(jié)?？蒲腥藛T借此深入分子層面，挖掘致病基因上下游通路異常，鎖定潛在醫(yī)療靶點(diǎn)，開(kāi)啟靶向藥物研發(fā)征程。

利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸（Morpholino）特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切，從而降低基因的表達(dá)水平，用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究；利用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性地瞬時(shí)破壞基因的編碼序列，從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達(dá)水平來(lái)研究基因的功能，用于各個(gè)階段的基因功能研究。破壞該基因正常表達(dá)，主要用于在動(dòng)物模型中研究基因的功能等。定點(diǎn)插入外源核酸片段，用于標(biāo)記基因的精細(xì)表達(dá)模式、破壞該基因正常表達(dá)、構(gòu)建點(diǎn)突變、實(shí)現(xiàn)時(shí)間空間上控制基因表達(dá)等。斑馬魚(yú)的鰓弓除了呼吸作用，還有其他生理功能。

斑馬魚(yú)的胚胎發(fā)育過(guò)程極具研究?jī)r(jià)值。其胚胎在體外發(fā)育，并且在早期階段是透明的，這一特性使得研究人員能夠借助顯微鏡直接觀察到胚胎內(nèi)部細(xì)胞的分裂、分化以及各種organ的形成過(guò)程，猶如在一個(gè)天然的 “透明實(shí)驗(yàn)室” 中見(jiàn)證生命的孕育與成長(zhǎng)。在受精后的 24 小時(shí)內(nèi)，斑馬魚(yú)胚胎就已經(jīng)開(kāi)始分化出多個(gè)胚層，隨后，心臟、神經(jīng)管、眼睛等重要organ逐漸形成，整個(gè)胚胎發(fā)育過(guò)程在較短時(shí)間內(nèi)完成，通常在 3 - 5 天內(nèi)幼魚(yú)即可孵化。這種快速而有序的發(fā)育模式為研究發(fā)育生物學(xué)的基本原理和機(jī)制提供了較好的機(jī)會(huì)。其肝臟在物質(zhì)代謝等方面承擔(dān)重要任務(wù)。斑馬魚(yú)貧血模型構(gòu)建

斑馬魚(yú)視覺(jué)系統(tǒng)發(fā)達(dá)，能敏銳感知光線變化與周?chē)矬w移動(dòng)。斑馬魚(yú)模型基因敲除構(gòu)建方法

PDX（Patient-Derived Xenograft）斑馬魚(yú)模型是tumor研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重大突破。它將患者來(lái)源的tumor組織移植到斑馬魚(yú)體內(nèi)，為精細(xì)醫(yī)學(xué)研究開(kāi)辟了新途徑。斑馬魚(yú)具有獨(dú)特的生物學(xué)特性，其胚胎透明，便于在顯微鏡下直接觀察腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程。而且斑馬魚(yú)繁殖迅速、子代數(shù)量多，能在短時(shí)間內(nèi)提供大量實(shí)驗(yàn)樣本。在 PDX 斑馬魚(yú)模型中，tumor組織在斑馬魚(yú)體內(nèi)微環(huán)境的作用下不斷發(fā)展，研究人員可以借此深入探究tumor的生物學(xué)行為，例如腫瘤細(xì)胞與血管生成的關(guān)系。通過(guò)對(duì)不同患者來(lái)源tumor的移植研究，能夠篩選出更具針對(duì)性的醫(yī)療藥物和方案，提高ancer醫(yī)療的有效性，為攻克ancer難題帶來(lái)新的曙光。斑馬魚(yú)模型基因敲除構(gòu)建方法