實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié):1、培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2、培養(yǎng)基過(guò)濾澄清:液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。通過(guò)國(guó)際安全認(rèn)證,滿足生物安全實(shí)驗(yàn)室等級(jí)要求。江西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器十分靈活——隨時(shí)可以讓你快速的滅菌制備高質(zhì)量的培養(yǎng)基。這可以好大限度的減少用于儲(chǔ)藏成品培養(yǎng)皿的空間,消除對(duì)培養(yǎng)皿儲(chǔ)存的管理,保證高質(zhì)量的培養(yǎng)基均一性。它能夠迅速而溫和的滅菌培養(yǎng)基并精確監(jiān)控和控制滅菌過(guò)程中的時(shí)間、溫度、壓力等參數(shù),從而保證其所有滅菌的產(chǎn)品都擁有同樣的,其直觀的圖形界面及可編程功能能使每個(gè)人都能方便的操作這臺(tái)儀器。培養(yǎng)基制備程序:Sampleprep可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié)。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水浴)模式預(yù)先溶解。同時(shí),直觀的圖形化界面使沒(méi)有經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設(shè)置多達(dá)50個(gè)滅菌程序,比如滅菌溫度、時(shí)間、分裝溫度等。它們可以被儲(chǔ)存起來(lái)并隨時(shí)調(diào)用。寧夏觸摸屏培養(yǎng)基制備器快速滅菌程序可在30分鐘內(nèi)完成標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基處理。 支持固體、液體及半固體培養(yǎng)基的一體化制備。
MS培養(yǎng)基的特點(diǎn):MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無(wú)機(jī)鹽濃度較高,十分有利于組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)和加速愈傷組織的生長(zhǎng)。因?yàn)榕浞街械碾x子濃度高,在配制、貯存、消毒等過(guò)程中,即使有些成分略有出入,也不會(huì)對(duì)離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來(lái)對(duì)愈傷組織可以進(jìn)行誘導(dǎo),或者用來(lái)培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當(dāng)比例和數(shù)量的無(wú)機(jī)養(yǎng)分,能夠滿足植物細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。
高效而強(qiáng)大的加熱和制冷系統(tǒng):功能強(qiáng)大的加熱器,能夠迅速加熱;快速制冷是通過(guò)循環(huán)水和壓力(加入內(nèi)部的軟化水產(chǎn)生的)所進(jìn)行的。利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內(nèi)部迅速冷卻,整個(gè)過(guò)程包括:加熱、滅菌和冷卻(至50°C),依據(jù)容器的大小、培養(yǎng)基的數(shù)量和冷卻水的溫度,只需60-120分鐘即可完成。負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過(guò)溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生。空氣壓縮機(jī)是內(nèi)置的。全自動(dòng)控制程序,確保內(nèi)部溫度均一,從而保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量,整個(gè)過(guò)程,在一個(gè)設(shè)定溫度內(nèi),從z初的加熱到混合和滅菌,z后到冷卻,都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險(xiǎn)鎖。殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無(wú)菌添加!
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過(guò)1000mL,否則滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問(wèn)題。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過(guò)度。這對(duì)于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過(guò)濾除菌:過(guò)濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行。使用孔徑為0.2μm的無(wú)菌設(shè)備和濾膜。消毒過(guò)濾設(shè)備的各個(gè)部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)(如物品),為了達(dá)到有效過(guò)濾,應(yīng)事先將濾膜用無(wú)菌水潤(rùn)濕。滅菌失效需驗(yàn)證溫度均勻性和保持時(shí)間。寧夏培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
快速升溫至目標(biāo)溫度(如121°C)可確保徹底殺滅微生物(包括耐熱芽孢),避免因升溫慢導(dǎo)致滅菌不徹底。江西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4、過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。5、分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,較多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。江西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器