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鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)。4°C沉淀10小時,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀。貴陽鼠尾膠原單價
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結(jié)構(gòu),可以用來當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外)才能完成生長過程,而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,細(xì)胞就能更好地貼附上去,除了培養(yǎng)皿,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長。昆明鼠尾膠原服務(wù)電話加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
鼠尾膠原實驗應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。
鼠尾膠原實驗應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級、一般級、醫(yī)藥級。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))立即混勻。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用。寧波南昌鼠尾膠原
可直接或間接參與細(xì)胞的附著。貴陽鼠尾膠原單價
膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。膠原蛋白可分為20幾個亞型,但為常見的為I、II、III型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。劃重點:任何動物的膠原都有許多共性,I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白。于是,動物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明:一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取,但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì),貴陽鼠尾膠原單價