鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。在以小鼠為模式生物進(jìn)行科學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)室中。珠海鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)
為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA,要從它們身上取下足量的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。為了盡可能減少對(duì)動(dòng)物的傷害和方便試驗(yàn)人員的操作,剪下一小段鼠尾是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。就讓我們來(lái)盤點(diǎn)一下「耗子尾汁」的三種用法↓↓↓鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的「耗子尾汁」。它可以用于監(jiān)測(cè)小鼠血液成分的變化,確認(rèn)小鼠是否患上了糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血,實(shí)驗(yàn)用鼠尾尖取血的取血量較小,但取血之后,小鼠還能繼續(xù)下一步建?;蛘邔?shí)驗(yàn),完全沒(méi)有性命之憂。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原報(bào)價(jià)使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對(duì)初步處理的鼠尾腱進(jìn)行酶解。
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的;同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對(duì)纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。方法制作鼠尾膠原,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來(lái)自大鼠的尾巴,制作過(guò)程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外)才能完成生長(zhǎng)過(guò)程,而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過(guò)程或者貼壁困難,這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,細(xì)胞就能更好地貼附上去,除了培養(yǎng)皿,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用。上海鼠尾膠原單價(jià)
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋。珠海鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過(guò)程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒(méi)被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì);3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán).所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng).這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。珠海鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)