外泌體(exosomes，Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細(xì)胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞，實現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨特的優(yōu)勢，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運輸效率和靶向性，可以穩(wěn)定存在于血液中，納米級尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。外泌體的提取方法：色譜法。武漢外泌體提取試劑單價

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān)，這可能是因為肝素與引物和/或酶有競爭作用。除了克制PCR，肝素可以與外泌體結(jié)合，阻止細(xì)胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達(dá)莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素），但是還是優(yōu)于其他選擇。此外，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進(jìn)外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數(shù)量。使用肝素時這種影響就不會發(fā)生，因此建議在測量外泌體的精確數(shù)量時選用肝素。但是也有研究表明肝素可以導(dǎo)致體外條件下外泌體的減少?？傊?，目前尚需要更多的研究論證抗凝劑是否及如何對外泌體的釋放，作用和下游反應(yīng)產(chǎn)生特異性影響。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進(jìn)行選擇性分離，便可獲得外泌體。

外泌體項目獲批學(xué)科方向：從統(tǒng)計來看，與前年相似外泌體立項集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué)，近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成，耐藥性，檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細(xì)胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標(biāo)志物的可能性。此外，在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病，中醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項目中標(biāo)。外泌體提取試劑直銷價外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時，量少。四是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實驗。五是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。六是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細(xì)菌，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。

由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)，另一方面也可以作為治病手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題，獲得高純度的外泌體對后續(xù)的研究至關(guān)重要。據(jù)了解，目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。深圳外泌體提取試劑直銷廠家

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外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等武漢外泌體提取試劑單價