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來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-10

拭子RNA提取試劑的選擇?應(yīng)有較高的提取得率。對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細(xì)胞裂解能力強(qiáng)、洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果離心柱硅膠膜吸附能力不好,裂解液和洗脫液沒有經(jīng)過很好的優(yōu)化,RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的確定,我們可以使用紫外分光光度法,但是不能作為判斷得率的單獨(dú)標(biāo)準(zhǔn),較好還是要做個(gè)PCR或熒光定量。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):無需氯化銫梯度離心,無需氯化鋰或乙醇沉淀。上海RNA提取試劑廠家推薦

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植物RNA提取:植物組織中,富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產(chǎn)物,或RNase的活性較高。這些物質(zhì)在細(xì)胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復(fù)合物或者膠狀沉淀,很難將其去除。所以我們在提取植物組織時(shí),要選取針對植物的試劑盒,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題。1、植物的果皮、果肉、種子、葉片等要在研缽中充分研磨,研磨過程中液氮要及時(shí)補(bǔ)充,避免樣品融化,研磨后的樣品應(yīng)迅速加入裂解液中震蕩混勻,避免RNA降解。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,則應(yīng)適當(dāng)減少提取用量,否則組織研磨及裂解不徹底,會使提取的RNA產(chǎn)量較低。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實(shí)、西瓜果實(shí)、桃子果實(shí)等則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量(可選100~200mg)。4、植物組織,如植物葉片、根莖、堅(jiān)硬的果實(shí)等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,再繼續(xù)進(jìn)行提取步驟。常規(guī)的組織勻漿機(jī)對植物組織的勻漿效果可能不佳,一般不建議使用。南昌RNA提取試劑廠家供應(yīng)總RNA提取試劑:試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個(gè)人防護(hù)。

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游離RNA(或稱循環(huán)RNA,cell-freeRNA,簡稱cfRNA),即存在于細(xì)胞外的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無創(chuàng)性診斷和研究的新分子標(biāo)志物。文獻(xiàn)總結(jié)了以下兩個(gè)方面,一方面游離RNA主要來源于tumour細(xì)胞,另一方面tumour細(xì)胞來源有凋亡、壞死、主動釋放三種機(jī)制,目前認(rèn)為以凋亡為主。游離RNA的生物學(xué)特征:游離RNA的結(jié)構(gòu)RNA相對DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病癥患者血清中含有更高濃度的核糖核酸酶,病癥患者血清中以RNA-蛋白脂復(fù)合物化學(xué)組成來保護(hù)RNA,半衰期大約為2天。本試劑盒采用獨(dú)特的配方和添加劑,能高效的分離血清、血漿及其它無細(xì)胞體液等樣品中分離出游離的RNA,另外本試劑還可以有效地壓制各種外源性和內(nèi)源性的RNA酶,同時(shí)結(jié)合特制的純化柱,能較大限度的保持RNA的完整性、高得率以及純度,并能保留小RNA,為需要進(jìn)行小RNA研究,如RNA的用戶提供了強(qiáng)有力的工具。

核糖核酸(縮寫為RNA,即RibonucleicAcid),存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種,即A(腺嘌呤)、G(鳥嘌呤)、C(胞嘧啶)、U(尿嘧啶),其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。核糖核酸在體內(nèi)的作用主要是引導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。人體一個(gè)細(xì)胞含RNA約10pg(含DNA約7pg)。與DNA相比,RNA種類繁多,分子量較小,含量變化大。RNA可根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA。非編碼大RNA包括核糖體RNA、長鏈非編碼RNA。非編碼小RNA包括轉(zhuǎn)移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA(20~300nt)包括miRNA、SiRNA、piRNA、scRNA、snRNA、snoRNA等,細(xì)菌也有小分子RNA(50~500nt)??焖俪绦蛟?5-40分鐘內(nèi)提供高質(zhì)量的總RNA。

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如果把一個(gè)細(xì)胞比作一個(gè)城市,那么DNA就像是一個(gè)管理人員,它坐在細(xì)胞核內(nèi),監(jiān)視著“細(xì)胞城”的一舉一動,像哪里細(xì)胞膜破了需要修補(bǔ),什么時(shí)候需要合成蛋白質(zhì),顯而易見,光靠我們DNA管理人員一個(gè)人自然忙不過來啦,于是我們的DNA管理人員決定給自己找一些“打工仔”,它們就是RNA,但是近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn),這些RNA似乎遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止一個(gè)普通默默無聞的“公務(wù)員”那樣簡單,它們在基因表達(dá)中發(fā)揮著不亞于DNA的巨大的作用,如2006年諾貝爾獎生理/醫(yī)學(xué)獎就頒發(fā)給了RNA干擾的兩位發(fā)現(xiàn)者。RNA干擾現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)為遺傳研究提供了一種強(qiáng)大的研究手段,這也說明這些對RNA的研究有著巨大的前景.而作為南大較好科研接班人的我們自然也不能甘于人后,于是我們決定從酵母RNA的提取開始做起??俁NA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷

以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。上海RNA提取試劑廠家推薦

動物細(xì)胞RNA提?。?、懸浮細(xì)胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液,這樣會使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè),從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸,從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞:棄掉培養(yǎng)基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細(xì)胞吹下來,轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中,加裂解液進(jìn)行提取。上海RNA提取試劑廠家推薦