糞便總RNA快速提取試劑盒:獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內(nèi)核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內(nèi)硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強,適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟??焖伲喗?,單個樣品操作一般可在1小時內(nèi)完成。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應??俁NA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質膜材料,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結合能力,與常用的抗凝劑(包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉、草酸鈉)兼容,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學實驗操作。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質膜制作的總RNA吸附柱,可以從普通植物的根、莖、葉中快速提取總RNA,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質的污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實驗。總RNA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質,提取RNA的純度高,產(chǎn)量大貴陽RNA提取試劑廠家供應血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質,提取RNA的純度高,產(chǎn)量大。
RNA的提取:眾所周知,Trizol是一種RNA提取試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質,能迅速破碎細胞和溶解細胞中的其他成分,壓制細胞釋放出核酸酶,維持細胞中RNA的穩(wěn)定性,我們可以在反應物中加入Trizol后搖勻,在加入氯仿離心,這樣的話我們的RNA就進入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)反應的pH,攪拌抽提一定時間后,離心分離上清液,調(diào)節(jié)pH至等電點,經(jīng)酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當稀釋,調(diào)pH7.0,這樣的話RNA就出現(xiàn)了,分別測定吸光值A260和A280并計算A260/A280,就可以測定RNA的提取率了。當然啦,我們還可以進行深入研究,如測定Nacl的濃度,PH的大小,以及抽提時間對RNA提取率的影響啦。
眾所周知,RNA提取是一項困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外,不同的樣品類型有自己獨特的特性,需要特別注意。例如,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細菌、菌類、古生菌等)的細胞壁堅硬,不易被化學和酶解。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),可與RNA共沉淀,并可壓制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,會快速降解RNA。為了使之較小化,較好在采集時穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而,這些方法也有缺點,如核酸的凍融損傷,并不是所有的研究人員在采集樣品時都能立即使用這些方法??俁NA提取試劑:自備新開封或專門氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。
RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法:1、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,或者是在提取過程中導致的降級;應當盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取,采集的樣本應當及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存,并減少反復凍融。在RNA提取過程中應當使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料,提取過程盡可能的快,提取后的RNA應置于冰盒上并及時放于-80凍存。如提取后的RNA需要進行凝膠電泳檢測,則應提取好后立刻進行電泳,電泳緩沖液應更換新配制的。2、鹽及有機溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,洗滌液中含有乙醇,在提取過程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒有充分晾干導致的,殘留的鹽及有機溶劑對后續(xù)的逆轉錄和PCR均存在不同程度的壓制作用,因此在提取過程中應充分去除組織裂解液,洗滌時應充分,使管壁四周均能被洗滌到,另外管子空離和吹風是必須的步驟,會進一步降低有機物殘留。好的試劑盒價格比較貴,在實驗室可以根據(jù)自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用。重慶正規(guī)RNA提取試劑廠家供應
細菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速從細菌體內(nèi)提取總RNA。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷
那RNA到底是什么呢?它又和基因有什么關系呢?基因的表達.其實人體內(nèi)的RNA主要和基因的表達有關系。不知道你思考過這么一個問題沒有,基因是我們體內(nèi)的遺傳物質,它如何來表達自己呢?事實上,這個過程是需要用到RNA的。具體來說是這樣的,由于染色體是存在于細胞核當中的,而根據(jù)上述的內(nèi)容,我們知道,基因其實是存在于染色體上的。如果一個基因要表達,只有兩種辦法,一個就是它親自到細胞核外去完成一切的生命活動,另一個辦法就是找個幫手來完成。而我們的基因選擇的是第二條路徑,也就是找一個幫手,這個幫手就是RNA,更準確地說是信使RNA(mRNA),基因會通過轉錄,利用堿基互補原則,合成一條信使RNA,這個過程都是在細胞核內(nèi)部完成的。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家直銷