一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別，膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型。但較為常見(jiàn)的為Ι、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。I型膠原蛋白分布非常普遍，是主纖維束的主要成分，給結(jié)締組織以強(qiáng)度；是較豐富的膠原蛋白類(lèi)型，尤其是在皮膚真皮、骨、筋和腱中。I型膠原蛋白分布非常普遍，是主纖維束的主要成分。天津鼠尾膠原報(bào)價(jià)

含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。徐州正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL；滴加1mol/L的氯化氫，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4，然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min。

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(，其生物力學(xué)強(qiáng)度極差，一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE，結(jié)果顯示：Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶，另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中，將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后，分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異。止血材料是常見(jiàn)的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn)；同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除，導(dǎo)致傷口潰爛，或者因?yàn)檎掣綄?dǎo)致傳染；再次就是止血材料多是通過(guò)吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血，很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來(lái)生產(chǎn)的?，F(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α-氰基丙烯酸酯類(lèi)組織膠、醫(yī)用止血明膠等，但是都有各自的缺點(diǎn)。如氧化纖維素可引起組織周?chē)鶳H值升高；α-氰基丙烯酸酯類(lèi)組織膠降解過(guò)程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì)；醫(yī)用止血明膠黏附性較差，易脫落，因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周?chē)M織等。4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀。徐州正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

制備鼠尾膠原：搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期。天津鼠尾膠原報(bào)價(jià)

要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把，有齒鑷1把，無(wú)齒鑷1把，200ml燒杯1個(gè)，培養(yǎng)皿1個(gè)，帶蓋廣口瓶1個(gè)，離心管、小瓶數(shù)個(gè)，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1％醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過(guò)濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴，洗凈，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴，用止血鉗夾住尾巴較高，折斷尾骨后拉出尾腱，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中，稱(chēng)尾腱的重量，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液，搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48小時(shí)，離心。吸取其上清，分裝至小瓶，4℃保存。上述制備過(guò)程均在無(wú)菌條件下完成。天津鼠尾膠原報(bào)價(jià)