RNA提取試劑注意事項(xiàng):1、必須戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品說話,以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。如皮膚接觸TRIReagent,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請聽取醫(yī)生意見。3、TRIReagent抽提總RNA的同時(shí),理論上也可抽提蛋白和DNA,但未經(jīng)測試。4、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。是基于異硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細(xì)胞和組織中提取總RNA的試劑,在樣品裂解或勻漿過程中取出水相,用異丙醇可沉淀回收RNA;中間層用乙醇沉淀可回收DNA;有機(jī)相用異丙醇沉淀可回收蛋白。提取的RNA樣品中不應(yīng)存在對酶存在壓制作用的有機(jī)溶劑及過高濃度的金屬離子。杭州RNA提取試劑服務(wù)電話
RNA提取:預(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒有開封使用過,通常不必再處理。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥,置潔凈處備用。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。唐山正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨植物RNA提取試劑:操作簡單,提取迅速,溶液毒性小,實(shí)驗(yàn)安全。
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。在此過程中,轉(zhuǎn)運(yùn)RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,而后核糖體RNA將各個(gè)氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。有些生物,例如一些病菌,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA。
RNA提取真正需要注意的要點(diǎn):你的植物組織樣本采樣、保存正常嗎?組織裂解充分了嗎?組織起始量是否過大?起始量過大的話,他們得帶進(jìn)去多少RNase呀,導(dǎo)致裂解液不能充分壓制內(nèi)源性的RNase,失敗就在預(yù)料之中!你的細(xì)胞活性好嗎?細(xì)胞都到衰亡期了,你提什么RNA呀;細(xì)胞加的那么多,破壁不充分,怎么裂解的好呢,他們本身得帶進(jìn)去多少內(nèi)源性RNase污染呀!轉(zhuǎn)移液體時(shí)吸到沉淀了嗎?吸水相時(shí)碰到中間層了嗎?乙醇干燥凈了嗎?裂解樣本的過程是重中之重液氮研磨(手工):要先加液氮預(yù)冷一下研缽,然后研磨,研磨過程要保證研缽中一直有少量液氮,研磨完成一個(gè)樣本后,直接加入裂解液渦旋震蕩后放常溫,或者直接丟到液氮中,全部研磨后一起加裂解液。液氮研磨(研磨儀):研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷,直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。在2ml圓底離心管(不需要無酶管,液氮研磨中不破裂就好)中加入5mm鋼珠一粒,放進(jìn)樣品,投入液氮中預(yù)冷。把所有預(yù)冷好的離心管**研磨模塊中,放進(jìn)研磨機(jī)震蕩20-30秒。完成后馬上加裂解液,渦旋。RNA提取試劑銷售廠家總共可以使用該試劑盒進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)提取。拭子RNA提取試劑的選擇?產(chǎn)品價(jià)格。
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點(diǎn):1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):方便快捷的離心柱操作方式。蘇州RNA提取試劑哪家便宜
RNA提取試劑注意事項(xiàng):硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細(xì)胞和組織中提取總RNA的試劑。杭州RNA提取試劑服務(wù)電話
RNA提取試劑注意事項(xiàng):1、需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。2、所有離心管,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時(shí)以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會(huì)被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時(shí)抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,并裂解樣品后凍存。杭州RNA提取試劑服務(wù)電話