無血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分。無血清細(xì)胞，無血清干細(xì)胞及MSC凍存液。保存條件：儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計(jì)劃時，盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低，推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細(xì)胞凍存液，細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后，平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較，BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表，BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。無血清凍存液使用方法：將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。蘇州無血清細(xì)胞凍存液廠家

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊]有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候，細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，如果沒有原始細(xì)胞的凍存，則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄。合肥正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：不含血清，較大減少細(xì)胞污染。

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)：1、凍存液比例一般是培養(yǎng)基：血清：DMSO=7:2:1或5:4:1；動物種屬的原代細(xì)胞凍存液可采用的比例是培養(yǎng)基：血清：DMSO=0:9:1，即直接用血清重懸細(xì)胞再加入DMSO，盡管如此，原代細(xì)胞的復(fù)蘇成活率還是很低。2、有文獻(xiàn)表明，細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙，因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確，目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中。

細(xì)胞凍存的操作步驟：1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；2.取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；4.離心1000rpm，5min；5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml～1×107/ml；6.將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml；7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者；8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。無血清細(xì)胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。

無血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對比：細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法，其中細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液，不光光是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存，在細(xì)胞的購買、寄贈、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑，在凍存細(xì)胞時將細(xì)胞懸浮于凍存液中，可使冰點(diǎn)降低，提高細(xì)胞膜對水的通透性，在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞，可以防止或減少冷凍冰晶對細(xì)胞的損傷作用。這樣就使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，在需要時直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性。同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞。溫州濟(jì)南無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液：凍存細(xì)胞，無需程序降溫。蘇州無血清細(xì)胞凍存液廠家

新常態(tài)下細(xì)胞凍存指南：細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍速融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。典型的細(xì)胞凍存液是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些實(shí)驗(yàn)室中仍然采用這種自制自配的凍存液，優(yōu)點(diǎn)是成本低，適合自己的細(xì)胞。蘇州無血清細(xì)胞凍存液廠家