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RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時,操作方便且經(jīng)濟實用。對于動物組織、簡單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,進一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線。該產(chǎn)品采用了獨特的細胞裂解系統(tǒng),無需苯酚氯仿抽提等步驟,簡單快捷。組織或細胞裂解后,提取操作光需20分鐘便可完成血漿/血清RNA提取試劑盒:普通植物總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱。合肥RNA提取試劑供應商
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差~北京RNA提取試劑服務電話血漿/血清RNA提取試劑盒:可以從普通植物的根、莖、葉中快速提取總RNA。
RNA提取試劑注意事項:1、需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。2、所有離心管,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,并裂解樣品后凍存。
RNA提取關(guān)鍵點病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性,在提取時,實驗人員需要佩戴口罩和手套等各種防護裝備,以防實驗室污染。而有種「自動滅活」的方法,在更加便利的同時,也能更好的保護實驗人員的安全。許多樣品中含有高水平的RNase,這種酶也會加速RNA的降解。為了使這種酶對降解的影響較小化,較好在采集時就穩(wěn)定好樣本中的RNA。這種情況下,可以在裂解緩沖液中立即進行溶解。比如可以通過TRIzol?、RNA裂解緩沖液等使RNase失活,然后再處理樣本。另外,再采集樣本之后馬上加入DNA/RNAShield,可以快速降解掉RNase等蛋白物質(zhì)。當然,DNA/RNAShield也會保證取樣時微生物基因多樣性不會發(fā)生改變。血漿/血清RNA提取試劑盒:對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力。
總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗。是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:是富含多酚或淀粉的植物組織中,提取高純度的總RNA。合肥石家莊RNA提取試劑
植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:RNA純度更高,無雜質(zhì)殘留,特別適合于對純度要求很高的下游實驗。合肥RNA提取試劑供應商
RNA提取注意事項:1、組織樣本要盡可能的新鮮,避免反復凍融。2、提取時組織要充分研磨,組織量不宜過少,更不宜過多。3、加入裂解液后應給予充分的孵育時間,使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時,分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸,不能多吸”,千萬不能提取到中間層,否則會導致嚴重的基因組DNA污染。5、洗滌時洗滌液應充分浸潤到管壁的四周,確保洗滌徹底。6、柱式提取法,洗滌完后除了對柱子進行空離后,還應當將吸附柱置于超凈臺內(nèi)吹風5~10min,使有機溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時候,當加入DEPC水后還應孵育3~5min,或者提前將DEPC水加熱至60℃,可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀,則應當給予適當溶解時間,并用泵頭不斷吹吸離心管底部。合肥RNA提取試劑供應商