我們向裂解液中加入針對某個已知蛋白（誘餌蛋白）的特異性抗體，抗體與誘餌蛋白結(jié)合形成抗原 - 抗體復(fù)合物。如同 IP 免疫沉淀一樣，借助 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠等固相載體，將抗原 - 抗體復(fù)合物從復(fù)雜的裂解液中分離出來。此時，與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白質(zhì)（獵物蛋白）也會隨著誘餌蛋白一起被沉淀下來，從而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)復(fù)合物的富集和分析，幫助我們了解細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系。實驗流程上，首先同樣是細(xì)胞或組織的裂解。細(xì)胞信號通路探索里，免疫沉淀助力揪出關(guān)鍵信號蛋白，明晰細(xì)胞信息傳遞奧秘。蘇州Co IP免疫沉淀實驗視頻

在實驗體系中，當(dāng)向含有目標(biāo)蛋白的生物樣品（如細(xì)胞裂解液、組織勻漿等）加入特異性抗體后，抗體迅速與目標(biāo)蛋白相互作用，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。為了從復(fù)雜的樣品中分離出這一復(fù)合物，通常會引入固相載體，如 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠。這些珠子表面的 Protein A 或 Protein G 能與抗體的 Fc 段特異性結(jié)合，通過離心或磁力分離等操作，就可以將抗原 - 抗體復(fù)合物從樣品中沉淀出來，從而實現(xiàn)對目標(biāo)蛋白的富集與純化 。IP 免疫沉淀的實驗流程包含多個關(guān)鍵步驟。南京anti DYKDDDDK免疫沉淀外包公司利用 Protein A/G 免疫沉淀，可深入探究蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的功能與相互作用。

但它也面臨一些挑戰(zhàn)。除了抗體質(zhì)量和特異性對實驗結(jié)果的影響外，由于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用復(fù)雜，可能存在一些弱相互作用或瞬時相互作用難以被檢測到。此外，一些蛋白質(zhì)在細(xì)胞裂解后可能會發(fā)生構(gòu)象變化，導(dǎo)致原本的相互作用消失，影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。展望未來，隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，Co-IP 免疫沉淀技術(shù)將與其他先進(jìn)技術(shù)如單細(xì)胞測序、冷凍電鏡等相結(jié)合，實現(xiàn)從單細(xì)胞水平到蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層面的解析蛋白質(zhì)相互作用。同時，新型抗體的開發(fā)和實驗方法的優(yōu)化，也將進(jìn)一步提高該技術(shù)的靈敏度和準(zhǔn)確性，為生命科學(xué)研究帶來更多突破。 相信在未來，Co-IP 免疫沉淀技術(shù)將繼續(xù)在蛋白質(zhì)相互作用研究中發(fā)揮重要作用，助力我們解開更多生命奧秘。

免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和生物化學(xué)實驗中的技術(shù)，主要用于從復(fù)雜混合物中分離和富集特定的目標(biāo)蛋白或多肽。該技術(shù)基于抗原與抗體之間的特異性結(jié)合，通過抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合，再利用固相載體（如瓊脂糖珠或磁珠）將抗原-抗體復(fù)合物從溶液中分離出來。免疫沉淀技術(shù)不僅可用于蛋白質(zhì)的純化，還可用于研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)翻譯后修飾以及蛋白質(zhì)功能分析等領(lǐng)域。免疫沉淀的基本步驟包括樣品制備、抗體孵育、復(fù)合物捕獲和洗脫。優(yōu)化免疫沉淀的反應(yīng)條件，如溫度、時間等，能顯著提高目標(biāo)分子的沉淀效率。

首先是樣品制備，對于細(xì)胞樣品，需要選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)條件，確保細(xì)胞處于正常生理狀態(tài)。收集細(xì)胞后，使用特定的裂解液進(jìn)行裂解，裂解液的成分需精心調(diào)配，既要保證細(xì)胞充分破碎，釋放出細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，又要避免破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與活性。裂解過程通常在低溫環(huán)境下進(jìn)行，以減少蛋白酶對蛋白質(zhì)的降解。細(xì)胞裂解完成后，將裂解液與特異性抗體混合，在適宜的溫度和時間條件下孵育，促進(jìn)抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合。一般來說，4℃孵育可以降低非特異性結(jié)合，提高實驗的特異性。免疫沉淀通過孵育、沉淀、清洗等步驟，從細(xì)胞裂解液中富集特定蛋白用于后續(xù)分析。杭州IP免疫沉淀技術(shù)服務(wù)

憑借抗原抗體的高親和力，免疫沉淀成為分離特定生物分子、探究其功能的常用手段。蘇州Co IP免疫沉淀實驗視頻

盡管免疫沉淀技術(shù)具有高特異性和廣泛的應(yīng)用前景，但其也存在一些局限性。例如，抗體的交叉反應(yīng)性可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果，而低豐度蛋白的檢測可能受到樣品復(fù)雜性和實驗靈敏度的限制。此外，免疫沉淀實驗通常需要較長的操作時間和較高的實驗成本。近年來，隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，免疫沉淀的衍生技術(shù)（如染色質(zhì)免疫沉淀ChIP、RNA免疫沉淀RIP）也在表觀遺傳學(xué)和RNA研究領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。這些技術(shù)進(jìn)一步拓展了免疫沉淀的應(yīng)用范圍，為科學(xué)研究提供了更多可能性。總之，免疫沉淀是一種強大的實驗技術(shù)，為蛋白質(zhì)研究提供了重要的工具。通過不斷優(yōu)化實驗條件和抗體選擇，免疫沉淀技術(shù)在基礎(chǔ)研究和臨床診斷中的應(yīng)用前景將更加廣闊。蘇州Co IP免疫沉淀實驗視頻