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外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過程比較費時，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉子類型有關），純度也受到...

細胞轉染：(1)轉染試劑的準備A.將400ul去核酸酶水加入管中，震蕩10秒鐘，溶解脂狀物。B.震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存，使用前還需震蕩，。(2)選擇合適的混合比例(1：1-1：2/脂質體體積：DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清...

細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中，科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按...

轉染效率：線型PEI(LinePEI,LPEI)與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率...

通用細胞凍存液(無血清)的簡介：隨著實驗室細胞培養(yǎng)的發(fā)展，除了原代培養(yǎng)之外，人工開發(fā)出來的細胞系的保存越來越重要。細胞冷凍的原理在于盡可能降低細胞內(nèi)的晶體形成，減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質對細胞造成的低溫損傷，從提高細胞復蘇時的存活率。細胞凍存的數(shù)量應保...

復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養(yǎng)細胞（參考離...

轉染的注意事項：細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據(jù)不同的細胞類型或應用而異。一般轉染時，貼壁細胞密度為70%-90%，懸浮細胞密度為2×106-4×106細胞/ml時效果較好。確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。因為轉染效率對細胞密度很敏感，所以在不同實驗...

糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調(diào)控。⑤細胞分化及其調(diào)控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧...

糖原及粘液染色法注意事項：1、糖原的固定要及時，而且標本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑，有它的弊病，因無水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化，（極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果較佳，其配法如下：苦味酸飽和于95%酒精85ml4...

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10...

1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌體可以直接刺激效應CD4+細胞的抗一些病癥反應。2007年HValadi等進一步發(fā)現(xiàn)細胞之間可以通過外泌體中RNA交...

膠原蛋白的功效與作用：一提起膠原蛋白，女性朋友們眼睛都放光了，因為我們都知道膠原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”，層中70%都是膠原蛋白，膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度！是讓我們皮膚變得有彈性的東西。大部分只知道需要補充膠原蛋白，但是卻不知道什么時候需要...

膠原蛋白的功效與作用：1、膠原蛋白中含有大量甘氨酸，在人體內(nèi)不僅參與合成膠原，而且還是大腦細胞中是一種克制性遞質，以產(chǎn)生對的安靜作用，對焦慮癥、神經(jīng)衰弱等有良好的治好作用膠原蛋白食品，在胃里可以克制蛋白質因胃酸作用引起的凝聚作用，從而有利于食物的消化，還有克制...

膠原蛋白的功效：1.膠原蛋白可以作為一種補鈣食品，膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運輸鈣到骨細胞的運載工具，骨細胞中的骨膠原是羥基磷灰石的粘合劑，它與羥基磷灰石共同構成了骨骼的主體。因此，只要攝入足夠的膠原蛋白，就能保證正常機體鈣質的攝入量，膠原蛋白可制...

具體實施方式實施例1止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯(lián)合發(fā)揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為0.2%0.2%。余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養(yǎng)小板，-40°C預凍池，再轉入_80°C超低溫冰箱急...

鼠尾膠原蛋白I型，用那一種膠原酶可以溶解：1．將膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2．建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度...

膠原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解，水解條件溫和，反應速率快，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構，蛋白純度高，理化性質穩(wěn)定，且無環(huán)境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法，即利用酶液直接提?。欢?..

鼠尾膠原，10mg包裝，配制方法如下：1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml，容量瓶配制比較準確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液（不要用*加，吸十次不如加一次z準確），加入盛膠原的瓶中，輕輕顛倒，不要震蕩，...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH...

糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高...

細胞轉染為什么不能加血清：傳統(tǒng)的轉染試劑一般會增加細胞的通透性，這樣會把血清中的成分帶入細胞，造成細胞毒性。陽離子脂質體，轉染的過程是帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內(nèi)吞。血清中含有大量的蛋白質，在轉染過程中，帶負電的蛋白質可能干擾陽離子脂...

總RNA的定義：總RNA=mRNA+tRNA+rRNA，即：總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發(fā)現(xiàn)lncRNA等microRNA的時候的概念。但是卻被各大公司默認的概念，一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網(wǎng)站，看一看總RNA提取...

人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜...

血清血液成分（加入抗凝劑）血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，所以血...

細胞轉染的原理、操作步驟以及小技巧：脂質體轉染操作步驟：(1)細胞培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。(2)轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔...

細胞轉染的注意事項：1.細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據(jù)不同的細胞類型或應用而異。因轉染試劑對細胞有毒害作用，細胞太少，容易死。一般轉染時，貼壁細胞密度為70%-90%，懸浮細胞密度為2-4×106細胞/ml，確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。因為轉染...

糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高...

特殊染色化學試劑的選擇：化學試劑的選擇主要針對自配試劑而言，對于商品化試劑盒則在于染液質量。1、一般要求選用很好品牌的化學試劑，特別是一些染色中關鍵的試劑。很好的化學試劑（如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等）是保證高質量染液的前提和關鍵，特別對于染液中的關鍵試...

細胞轉染為什么不能加血清：不同的細胞及轉染試劑要求轉染的條件是不同的。較好是在靠前次實驗前做一個預實驗，比如：HeLa，293，CHO，COS7，MCF－7，HepG2等細胞，是否加血清，對不同的細胞是有不同的影響的，有些細胞是可以有血清的，有些加血清就會受影...