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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)...
細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要...
EdU細胞增殖檢測試劑盒BeyoClick?EdU細胞增殖檢測試劑盒(DAB法)(BeyoClick?EdUCellProliferationKitwithDAB),是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethyny...
EdU細胞增殖檢測試劑盒BeyoClick?EdU細胞增殖檢測試劑盒(DAB法)(BeyoClick?EdUCellProliferationKitwithDAB),是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethyny...
EdU法中的點擊反應原理圖。摻入到細胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標記的疊氮化物,在銅離子的催化下發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),使細胞DNA標記上熒光探針或生物素。細胞增殖檢測是評估細胞活性、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎(chǔ)實驗手段。細胞增殖檢測的方法按...
搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應液組...
通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例...
避免反復凍融。如短時間內(nèi)需多次重復使用,請于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻...
具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mo...
缺點:該移植模型的原發(fā)出現(xiàn)與轉(zhuǎn)移發(fā)生之間時間間隔短,不利于藥物藥效研究;且細胞為鼠源,與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細胞或組織移植入免疫缺陷型實驗動物體內(nèi)。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠,例如無胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組...
EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo?熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一...
本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測方面的研究,比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬...
即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9...
空白組卵巢內(nèi)細胞形態(tài)完整,可見各級卵泡生長活躍,并大多數(shù)為原始卵泡,卵泡顆粒層較多,黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細胞浸潤,各級卵泡減少,閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見很少次各級卵泡,及成熟卵泡,大多數(shù)為閉鎖卵泡,卵泡顆粒層...
實驗期間每天進行陰道涂片,觀測動情周期變化。進一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細胞涂片法,使...
葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型:1、動物模型名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實驗動物種屬:BALB/c小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年鼠5、實驗動物體重:18g-22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:...
ng)=×片段堿基對數(shù)(單片段);適片段用量(ng)=×片段堿基對數(shù)(多片段)。注1:單片段重組反應,若單個插入片段的長度大于載體,則應將載體與插入片段的計算公式互換;注2:單片段重組反應,若單個插入片段的長度小于200bp,則插入片段應使用5倍的用量;注3:...
得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大?。寒敶笫篌w重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在...
可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有...
EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo?熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一...
EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒...
保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項:由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取...
其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,...
動物購買的途徑、安置的地點,飲食管理(一般實驗室會有動物房,也可以從其他地方購買),動物免疫證明、倫理證明需要提前準備好。實驗相關(guān)的試劑和藥物:比如造模藥物和器械,動物干預所需藥物,陽物選擇及購買(有些藥物購買很困難,必須通過特殊程序才能買到)。如果涉及到有創(chuàng)...
大到動物死亡原因分析,小到灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結(jié)出每天實驗的優(yōu)缺點。做任何一個操作之前,建議提前腦海中反復模擬,準備好相關(guān)工具和試劑,避免臨用之際缺少藥的,影響實驗操作節(jié)奏和個人心情。筆者曾經(jīng)灌胃操作的時候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了,只好重新回實驗室準備,...
PMID:15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動物模型1.糖尿病***1)模型構(gòu)建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時與ApoE-/-小...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組...
建立肝動物模型的主要方式有二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)大鼠肝4-二甲基氨基偶氮苯(DBA)誘發(fā)大鼠肝。用2-乙酰氨基酸(2AAF)誘發(fā)大鼠肝。用亞氨基偶氮甲苯(OAAT)誘發(fā)大鼠肝。用黃曲霉素誘發(fā)大鼠。2、胃:制備胃動物模型的主要方式有①甲基膽蒽(MC)誘發(fā)小鼠...
大到動物死亡原因分析,小到灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結(jié)出每天實驗的優(yōu)缺點。做任何一個操作之前,建議提前腦海中反復模擬,準備好相關(guān)工具和試劑,避免臨用之際缺少藥的,影響實驗操作節(jié)奏和個人心情。筆者曾經(jīng)灌胃操作的時候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了,只好重新回實驗室準備,...