冷凍電鏡已有幾十年的歷史了,它的原理是向快速冷凍的樣品發(fā)射電子并記錄生成的圖像從而確定其形狀。探測(cè)回彈電子的技術(shù)以及圖像分析軟件的進(jìn)步觸發(fā)了一場(chǎng)始于2013年的“分辨率改變”,并讓研究人員得到了比較清晰的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)——幾乎與利用X射線晶體技術(shù)得到的結(jié)果一樣好。X射線晶體技術(shù)的出現(xiàn)時(shí)間更早,主要根據(jù)蛋白質(zhì)晶體被X射線轟擊時(shí)形成的衍射圖案推斷蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。后續(xù)的軟硬件更新使得冷凍電鏡的結(jié)構(gòu)分辨率得到了更大的提升。但是科學(xué)家還是要依賴(lài)X射線晶體學(xué)才能獲得原子分辨率的結(jié)構(gòu)。問(wèn)題是,研究人員可能要花幾個(gè)月到幾年的時(shí)間才能使蛋白質(zhì)結(jié)晶,而且許多醫(yī)學(xué)上重要的蛋白質(zhì)不會(huì)形成可用的晶體;相比之下,冷凍電鏡只需要把蛋白質(zhì)置于純化溶液中即可。生物顯微鏡的鏡片都是用精密加工過(guò)的光學(xué)玻璃片制成的。二手OLYMPUS MX61L顯微鏡
生物顯微鏡的鏡片都是用精密加工過(guò)的光學(xué)玻璃片制成的,為了增加透光率,都需在光學(xué)玻璃片的兩面涂上一層很薄的透光膜。這樣透光率就可以達(dá)到97%—98%。這一層透光膜表面很平整光滑,且很薄,一旦透光膜表面被擦傷留有痕跡,它的透光率就會(huì)受到很大影響。觀察時(shí)會(huì)變得模糊不清。所以在擦拭鏡片時(shí),一定要用干凈柔軟的綢布或干凈毛筆輕輕擦拭,若用擦鏡紙擦拭則更要輕輕擦拭,以免損傷透光膜。若是目鏡、物鏡鏡頭內(nèi)部的鏡片被污染或霉變,就必須拆開(kāi)清洗。目鏡可直接擰開(kāi)拆下后進(jìn)行清洗。但物鏡的結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,鏡片的疊放,各鏡片間的距離都有非常嚴(yán)格的要求,精度也很高。生產(chǎn)廠家在裝配時(shí)是經(jīng)過(guò)精確校正而定位的。所以拆開(kāi)清洗干凈后,必須嚴(yán)格按原樣裝配好。深圳SLMPLN 100X顯微鏡物鏡有用嗎暗視野實(shí)際是暗場(chǎng)照明。
原子力顯微鏡使用超微針尖靠近樣品表面,樣品表面與針尖的原子間相互作用力使得針尖所在的懸臂發(fā)生微小形變,被放大測(cè)量后轉(zhuǎn)化成樣品表面形貌的信息。橫向分辨率能夠達(dá)到納米量級(jí),其分辨率極大依賴(lài)于探針工藝的精細(xì)程度,若以比較先進(jìn)的碳納米管做探針,橫向分辨率則能突破埃量級(jí)。原子力顯微鏡除了用于樣品表面形貌成像外,還是顯微操作的重要工具,對(duì)針尖表面進(jìn)行修飾后可以于待測(cè)量的分子特異性相互作用,并進(jìn)行拉伸,擠壓等操作,對(duì)其力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測(cè)量。
光學(xué)顯微鏡使用可見(jiàn)光進(jìn)行照明,用光學(xué)透鏡進(jìn)行聚焦,人眼或者 CCD/CMOS 相機(jī)進(jìn)行觀察。比較基本的明場(chǎng)照明顯微鏡由光源,目鏡,物鏡,載物臺(tái),聚光鏡,光圈等部件組成。收到衍射效應(yīng)的限制,光學(xué)顯微鏡的分辨率極限由極限給出,阿貝極限將光學(xué)顯微鏡的分辨率限制在約200納米處。 為了提高顯微鏡的成像素質(zhì),擴(kuò)展應(yīng)用范圍,光學(xué)顯微鏡經(jīng)過(guò)不斷的發(fā)展改進(jìn),已經(jīng)成為一個(gè)龐大的家族。電子顯微鏡以電子束作為光源對(duì)樣品進(jìn)行照明。由于電子的波長(zhǎng)小于可見(jiàn)光,電子顯微鏡的分辨率相對(duì)于光學(xué)顯微鏡明顯提高,目前已經(jīng)可以超過(guò)50皮米(1皮米等于千分之一納米)。光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡有很大區(qū)別。
原子力顯微鏡因其超高的成像分辨率,常常獲得令人驚艷的結(jié)果。自然界里,氫原子與電負(fù)性大的原子X(jué)以共價(jià)鍵結(jié)合,它們?nèi)襞c電負(fù)性大、半徑小的的原子Z(O、F、N)接觸生成X-H…Z形式的一種特殊的分子間或分子內(nèi)相互作用,則為氫鍵。這一教科書(shū)上的定義,一直以來(lái)為大家所熟知, 然而人們始終無(wú)法窺探其原本“容貌”。中國(guó)國(guó)家納米科學(xué)中心的科學(xué)家們利用原子力顯微鏡技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)化學(xué)分子間作用的直接成像,在國(guó)際上初次直接觀察到了分子間的氫鍵。這一研究成果使我們教科書(shū)里的“氫鍵”變成了“眼見(jiàn)為實(shí)”。隨后,又有科學(xué)家利用原子力顯微鏡對(duì)單分子中氫鍵的強(qiáng)度進(jìn)行研究,這一測(cè)量結(jié)果與理論計(jì)算精確吻合。雙目體視顯微鏡又稱(chēng)"實(shí)體顯微鏡"或"解剖鏡"。廣州體視顯微鏡價(jià)錢(qián)
很多顯微鏡名字很類(lèi)似,但工作原理區(qū)別很大。二手OLYMPUS MX61L顯微鏡
使用顯微鏡前,首先要把顯微鏡的目鏡和物鏡安裝上去。目鏡的安裝極為簡(jiǎn)單,主要的問(wèn)題在于物鏡的安裝,由于物鏡鏡頭較貴重,萬(wàn)一安裝時(shí)螺紋沒(méi)合好,易摔到地上,造成鏡頭損壞,所以為了保險(xiǎn)起見(jiàn),在安裝物鏡時(shí)用左手食指合中指托住物鏡,然后用右手將物鏡裝上去,這樣即使沒(méi)安裝好,也不會(huì)摔到地上。對(duì)光是使用顯微鏡時(shí)很重要的一步,一定要用低倍鏡對(duì)光,當(dāng)光線較強(qiáng)時(shí)用小光圈,平面鏡,而光線較弱時(shí)則用大光圈,凹面鏡,反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動(dòng),當(dāng)看到均勻光亮的圓形視野為止。光對(duì)好后不要隨便的移動(dòng)顯微鏡,以免光線不能準(zhǔn)確的通過(guò)反光鏡進(jìn)入通光孔。二手OLYMPUS MX61L顯微鏡