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數(shù)值孔徑簡寫NA,數(shù)值孔徑是顯微鏡物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對(duì)物鏡而言)性能高低(即消位置色差的能力,蔡司公司的數(shù)值孔是說明消位置色差和倍率色差的能力),的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)科在物鏡和聚光鏡的外殼上。數(shù)值孔徑(NA)是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(η)和孔徑角(u)半數(shù)的正玄之乘積。用公式表示如下:NA=ηsinu/2 孔徑角又稱“鏡口角”,是物鏡光軸上的物體點(diǎn)與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度。孔徑角越大,進(jìn)入物鏡的光通亮就越大,它與物鏡的有效直徑成正比,與焦點(diǎn)的距離成反比。顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)有三種光學(xué)系統(tǒng)。ECLIPSE L300N反射顯微鏡能看什么
透射電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡類似,采用高能電子束作為光源,電磁透鏡進(jìn)行聚焦,利用樣品對(duì)電子的散射和透射形成明暗反差來成像,用熒光屏或感光膠片對(duì)圖像進(jìn)行記錄。傳統(tǒng)透射電鏡受到球差影響限制,分辨率在0.2納米左右,而隨著硬件條件不斷發(fā)展,現(xiàn)在已經(jīng)突破50皮米。透射電鏡的局限性在于要求樣品的厚度非常薄,通常不超過0.1微米,對(duì)樣品的制備造成了很大的挑戰(zhàn),同時(shí)高能電子以及真空環(huán)境可能對(duì)樣品產(chǎn)生傷害。掃描電子顯微鏡使用電子“探針”對(duì)樣品表面進(jìn)行掃描,電子束激發(fā)樣品表面放出二次電子,并被探測(cè)器收集成像。掃描電鏡的分辨率為納米級(jí),通常比透射電鏡要弱。但它不要求對(duì)樣品進(jìn)行切片,可以進(jìn)行三維成像,而且對(duì)真空度要求不高,可以對(duì)很多生物樣品進(jìn)行成像。廣州金相測(cè)量顯微鏡供應(yīng)商顯微鏡的放大倍數(shù)為目鏡倍數(shù)乘物鏡倍數(shù),如目鏡為10倍,物鏡為40倍,則放大倍數(shù)為40×10倍。
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過程中,相襯鏡檢術(shù)的發(fā)明成功,是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。我們知道,人眼只能區(qū)分光波的波長(顏色)和振幅(亮度),對(duì)于無色通明的生物標(biāo)本,當(dāng)光線通過時(shí),波長和振幅變化不大,在明場(chǎng)觀察時(shí)很難觀察到標(biāo)本。相襯顯微鏡利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢,也就是有效地利用光的干涉現(xiàn)象,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?,即使是無色透明的物質(zhì)也可成為清晰可見。這極大便利了胞的觀察,因此相襯鏡檢法普遍應(yīng)用于倒置顯微鏡中。相襯鏡檢法在裝置上與明場(chǎng)不同,有一些特殊要求:a.環(huán)狀光闌(Ringslit):裝在聚光鏡的下方,而與聚光鏡組合為一體---相襯聚光鏡。它是由大小不同的環(huán)形光闌裝在一圓盤內(nèi),外面標(biāo)有10X、20X、40X、100X等字樣,與相對(duì)應(yīng)倍數(shù)的物鏡配合使用。b.相板(Phaseplate):裝在物鏡的后焦平面處,它分為兩部分,一是通過直射光的部分,為半透明的環(huán)狀,叫共軛面;另一是通過衍射光的部分,?quot;補(bǔ)償面"。有相板的物鏡稱"相襯物鏡",外殼上常有"Ph"字樣。
使用準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距,找到物象可以說是顯微鏡使用中比較重要的一步。在操作中極易出現(xiàn)以下錯(cuò)誤:一是在高倍鏡下直接調(diào)焦;二是不管鏡筒上升或下降,眼睛始終在目鏡中看視野;三是不了解物距的臨界值,物距調(diào)到2~3厘米時(shí)還在往上調(diào),而且轉(zhuǎn)動(dòng)準(zhǔn)焦螺旋的速度很快。前兩種錯(cuò)誤結(jié)果往往造成物鏡鏡頭抵觸到裝片,損傷裝片或鏡頭,而第三種錯(cuò)誤則是在使用顯微鏡時(shí)比較常見的一種現(xiàn)象。針對(duì)以上錯(cuò)誤,使用時(shí)一定要注意,調(diào)節(jié)焦距一定要在低倍鏡下調(diào),先轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒慢慢下降,物鏡靠近載玻片,但注意不要讓物鏡碰到載玻片,在這個(gè)過程中眼睛要從側(cè)面看物鏡,然后用左眼朝目鏡內(nèi)注視,并慢慢反向調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看到物像為止,一般顯微鏡的物距在1厘米左右,所以如果物距已遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過1厘米,但仍未看到物象,那可能是標(biāo)本未在視野內(nèi)或轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋過快,此時(shí)應(yīng)調(diào)整裝片位置,然后再重復(fù)上述步驟,當(dāng)視野中出現(xiàn)模糊的物象時(shí),就要換用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié),只有這樣,才能縮小尋找范圍,提高找到物象的速度。復(fù)合顯微鏡是在科學(xué)實(shí)驗(yàn)室中較常用的的顯微鏡。
顯微鏡的成像(幾何成像)原理顯微鏡之所以能將被檢物體進(jìn)行放大,是通過透鏡來實(shí)現(xiàn)的。單透鏡成像具有像差,嚴(yán)重影響成像質(zhì)量。因此顯微鏡的主要光學(xué)部件都由透鏡組合而成。從透鏡的性能可知,只有凸透鏡才能起放大作用,而凹透鏡不行。顯微鏡的物鏡與目鏡雖都由透鏡組合而成,但相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡。為便于了解顯微鏡的放大原理,簡要說明一下凸透鏡的5種成像規(guī)律:(1)當(dāng)物于透鏡物方二倍焦距以外時(shí),則在像方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)像;(2)當(dāng)物體在透鏡物方二倍焦距上時(shí),則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)像;(3)當(dāng)位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),焦點(diǎn)以外時(shí),則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)像;(4)當(dāng)物**于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí),則像方不能成像;(5)當(dāng)物位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時(shí),則像方也無像的形成,而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛像。顯微鏡的成像原理就是利用上述(3)和(5)的規(guī)律把物體放大的。當(dāng)物體處在物鏡前F-2F(F為物方焦距)之間,則在物鏡像方的二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)像。通??蛻粼谑褂蔑@微鏡的時(shí)候?qū)吧畹囊蟛皇呛芨?。廣州尼康mm-800顯微鏡是多少倍
放大率也是顯微鏡的重要參數(shù),但也不能盲目相信放大率越高越好。ECLIPSE L300N反射顯微鏡能看什么
光學(xué)顯微鏡是比較普遍的一個(gè)顯微鏡,通常用來觀察一些透明的物體,其光源在載玻片的底端,是透過載玻片上的可透光被觀察對(duì)象,然后通過目鏡和物鏡的放大來觀測(cè),看到的照片比較簡單的就是洋蔥表皮,菠菜下表皮,原生動(dòng)物,細(xì)菌還有各種切片。熒光顯微鏡是某些光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)上添加一個(gè)熒光組件,可以將一些經(jīng)過特殊處理的細(xì)胞進(jìn)行 熒光激發(fā)而后得到比較有特色的熒光照片。掃描電鏡是一種能看到立體結(jié)構(gòu)的顯微鏡(雖然說這樣說不準(zhǔn)確,但是這樣應(yīng)該比較好理解)是經(jīng)過噴金后電子束打到樣品上,經(jīng)過一行行掃描將圖像傳輸至顯示屏幕。只能看到黑白灰,顏色應(yīng)該是后期染的。ECLIPSE L300N反射顯微鏡能看什么