光學(xué)顯微鏡是一個大類,里面包含了熒光顯微鏡。透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡是另一個大類,電子顯微鏡。光學(xué)顯微鏡使用紫外線到近紅外部分的可見光來成像,大概360-1100nm都算光學(xué)顯微鏡的范圍,較典型的是明場觀察的生物顯微鏡,比如ML31,可以用來看樣本切片,也可以用來檢查水質(zhì)、寄生蟲等用途,如果加入了偏光(ML31-P)、相襯(ML31+相襯聚光鏡)等技術(shù)后,還能用來看金相、活細胞(一般活細胞更推薦倒置顯微鏡,如MI52-N)等樣品。熒光顯微鏡區(qū)別于一般光學(xué)顯微鏡,在于使用了熒光光源和熒光濾光片組,比如寬光譜大功率熒光光源MG-100,光譜覆蓋常用熒光染料的激發(fā)波段,通過熒光濾光片組選定激發(fā)波段和發(fā)射波段,把經(jīng)過熒光染色的目標微結(jié)構(gòu)或成分特異化標記出來,以此能判斷細胞器、病毒、細菌等難以觀察的目標的宏觀分布和結(jié)構(gòu)、變化情況。光學(xué)部分是較為關(guān)鍵的,它由目鏡和物鏡組成。廣東STM7-MFA顯微鏡使用方法
分辨率又稱“鑒別率”,“解像力”。是衡量顯微鏡性能的又一個重要技術(shù)參數(shù)。顯微鏡的分辨率用公式表示為:d=0.61λ/NA 式中d為較小分辨距離;λ為光線的波長;NA為物鏡的數(shù)值孔徑??梢娢镧R的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個因素決定。NA值越大,照明光線波長越短,則d值越小,分辨率就越高。要提高分辨率,即減小d值,可采取以下措施。 降低波長λ值,使用短波長光源。曾大介質(zhì)η值和提高NA值(NA=ηsinu/2)。消色差。增加明暗反差。二手尼康生物顯微鏡能看什么電子顯微鏡可把物體放大到200萬倍。
冷凍電鏡已有幾十年的歷史了,它的原理是向快速冷凍的樣品發(fā)射電子并記錄生成的圖像從而確定其形狀。探測回彈電子的技術(shù)以及圖像分析軟件的進步觸發(fā)了一場始于2013年的“分辨率改變”,并讓研究人員得到了比較清晰的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)——幾乎與利用X射線晶體技術(shù)得到的結(jié)果一樣好。X射線晶體技術(shù)的出現(xiàn)時間更早,主要根據(jù)蛋白質(zhì)晶體被X射線轟擊時形成的衍射圖案推斷蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。后續(xù)的軟硬件更新使得冷凍電鏡的結(jié)構(gòu)分辨率得到了更大的提升。但是科學(xué)家還是要依賴X射線晶體學(xué)才能獲得原子分辨率的結(jié)構(gòu)。問題是,研究人員可能要花幾個月到幾年的時間才能使蛋白質(zhì)結(jié)晶,而且許多醫(yī)學(xué)上重要的蛋白質(zhì)不會形成可用的晶體;相比之下,冷凍電鏡只需要把蛋白質(zhì)置于純化溶液中即可。
偏光顯微鏡被普遍地應(yīng)用在礦物、化學(xué)等領(lǐng)域,在生物學(xué)和植物學(xué)也有應(yīng)用。偏光顯微是鑒定物質(zhì)細微結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的一種顯微鏡。凡具有雙折射性的物質(zhì),在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚,當然這些物質(zhì)也可用染色法來進行觀察,但有些則不可能,而必須利用偏光顯微鏡。偏光顯微鏡的特點,就是將普通光改變?yōu)槠窆膺M行鏡檢的方法,以鑒別某一物質(zhì)是單折射性(各向同性)或雙折射性(各向異性)。雙折射性是晶體的基本特征。因此,偏光顯微鏡被普遍地應(yīng)用在礦物、高分子、纖維、玻璃、半導(dǎo)體、化學(xué)等領(lǐng)域。在生物學(xué)中,很多結(jié)構(gòu)也具有雙折射性,這就需要利用偏光顯微鏡加以區(qū)分。在植物學(xué)方面,如鑒別纖維、染色體、紡錘絲、淀粉粒、細胞壁以及細胞質(zhì)與組織中是否含有晶體等。在植物病理上,病菌的入侵,常引起組織內(nèi)化學(xué)性質(zhì)的改變,可以偏光顯微術(shù)進行鑒別。顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。
冷凍電鏡已有幾十年的歷史了,它的原理是向快速冷凍的樣品發(fā)射電子并記錄生成的圖像從而確定其形狀。探測回彈電子的技術(shù)以及圖像分析軟件的進步觸發(fā)了一場始于2013年的“分辨率改變”,并讓研究人員較終得到了較清晰的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)——幾乎與利用X射線晶體技術(shù)得到的結(jié)果一樣好。X射線晶體技術(shù)的出現(xiàn)時間更早,主要根據(jù)蛋白質(zhì)晶體被X射線轟擊時形成的衍射圖案推斷蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。后續(xù)的軟硬件更新使得冷凍電鏡的結(jié)構(gòu)分辨率得到了更大的提升。但是科學(xué)家還是要依賴X射線晶體學(xué)才能獲得原子分辨率的結(jié)構(gòu)。問題是,研究人員可能要花幾個月到幾年的時間才能使蛋白質(zhì)結(jié)晶,而且許多醫(yī)學(xué)上重要的蛋白質(zhì)不會形成可用的晶體;相比之下,冷凍電鏡只需要把蛋白質(zhì)置于純化溶液中即可。顯微鏡這類產(chǎn)品是一種尤其精密的儀器,一定要小心輕放。蔡司顯微鏡哪個品牌好
光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡有很大區(qū)別。廣東STM7-MFA顯微鏡使用方法
顯微鏡的照明裝置:顯微鏡的照明方法按其照明光束的形成,可分為“透射式照明”,和“落射式照明”兩大類。前者適用于透明或半透明的被檢物體,絕大數(shù)生物顯微鏡屬于此類照明法;后者則適用于非透明的被檢物體,光源來自上方,又稱“反射式或落射式照明”。主要應(yīng)用與金相顯微鏡或熒光鏡檢法。透射式照明:中心照明:這是較常用的透射式照明法,其特點是照明光束的中軸與顯微鏡的光軸同在一條直線上。它又分為“臨界照明”和“柯勒照明”兩種。廣東STM7-MFA顯微鏡使用方法
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