標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂:多功能微生物培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究和檢測(cè)的培養(yǎng)基,適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng)、分離和計(jì)數(shù)。配方與制備標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂的典型配方為:蛋白胨:15g/L酵母提取物:3g/LD-葡萄糖:1g/L氯化鈉:6g/L瓊脂粉:15g/L制備方法如下:稱取40g培養(yǎng)基干粉,加入1L去離子水中。加熱煮沸至完全溶解。121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻至55℃以下后,倒入無菌平皿,每個(gè)90mm培養(yǎng)皿中倒入15-20mL培養(yǎng)基。應(yīng)用領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng),包括但不限于:計(jì)數(shù)與分離:用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離。增菌:為細(xì)菌提供豐富的營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)其生長(zhǎng)。特殊培養(yǎng)基的制備:可作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加血液、腹水或血清后用于培養(yǎng)鏈球菌、肺炎球菌等苛養(yǎng)菌。無菌檢測(cè):推薦用于好氧菌的無菌檢測(cè)。注意事項(xiàng)稱量與溶解:稱量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道不適。溶解時(shí)建議水溫在40℃以下,避免瓊脂結(jié)塊。滅菌:滅菌后需充分搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。保存:干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30℃的環(huán)境中儲(chǔ)存。使用:已凝固的培養(yǎng)基不可反復(fù)多次加熱溶化使用。牛膽鹽和去氧膽酸鈉作為選擇性抑菌劑,可有效抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),同時(shí)促進(jìn)革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng)。25%甘油硝酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿
腦心浸出液肉湯(BHI):營(yíng)養(yǎng)豐富的微生物培養(yǎng)基腦心浸出液肉湯(Brain Heart Infusion Broth,簡(jiǎn)稱BHI)是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究和檢測(cè)的培養(yǎng)基,特別適用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌、酵母和霉菌。制備方法:稱取37.0g培養(yǎng)基干粉,加入1L蒸餾水或去離子水中。加熱煮沸至完全溶解。分裝至試管或三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻后備用。檢驗(yàn)原理BHI培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分主要來源于胰蛋白胨、牛心浸粉和葡萄糖。胰蛋白胨和牛心浸粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖為多種細(xì)菌提供能源;氯化鈉維持滲透壓平衡;磷酸氫二鈉作為緩沖劑。應(yīng)用BHI培養(yǎng)基用途廣,包括:培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。用于培養(yǎng)單增李斯特菌,可顯著提高培養(yǎng)時(shí)的OD值。作為藥敏實(shí)驗(yàn)的接種用培養(yǎng)基。配制血液培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)致病性菌。質(zhì)量控制質(zhì)控菌株接種待測(cè)試培養(yǎng)基,35~37℃,需氧培養(yǎng)18~24小時(shí),結(jié)果如下:金黃色葡萄球菌(ATCC 6538):肉湯混濁,生長(zhǎng)良好。注意事項(xiàng)儲(chǔ)存條件:陰涼干燥、通風(fēng)處保存,保質(zhì)期三年。使用時(shí)需注意無菌操作,避免污染。BHI培養(yǎng)基因其營(yíng)養(yǎng)豐富、制備方便和應(yīng)用廣,已成為微生物培養(yǎng)中的重要工具。VRE瓊脂平板腸球菌顯色培養(yǎng)基通過顯色反應(yīng),使腸球菌在培養(yǎng)基上形成紅色至紫色的菌落,其他菌則顯無色、黃色或被抑制。
霉菌培養(yǎng)基具有出色的抑制雜菌能力,宛如為霉菌培育打造的 “純凈衛(wèi)士”。在霉菌培養(yǎng)過程中,雜菌的污染可能會(huì)與霉菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、改變培養(yǎng)基的理化性質(zhì),甚至產(chǎn)生抑制霉菌生長(zhǎng)的物質(zhì),從而嚴(yán)重影響霉菌的培養(yǎng)效果。為了避免這種情況,該培養(yǎng)基添加了一些具有選擇性抑制作用的成分。例如,某些抗生物質(zhì)或抑菌劑能夠特異性地抑制細(xì)菌、酵母菌等常見雜菌的生長(zhǎng),而對(duì)霉菌的生長(zhǎng)影響較小。同時(shí),通過調(diào)整培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分和培養(yǎng)條件,如降低易被雜菌利用的碳源或氮源的濃度、控制培養(yǎng)溫度和 pH 值等,也可以進(jìn)一步抑制雜菌的生長(zhǎng)繁殖,為霉菌創(chuàng)造一個(gè)相對(duì)純凈的生長(zhǎng)環(huán)境。在霉菌的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)中,有效抑制雜菌污染能夠提高發(fā)酵效率和產(chǎn)品質(zhì)量,減少生產(chǎn)成本和損失,保障霉菌發(fā)酵產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展,凸顯了該培養(yǎng)基抑制雜菌特性的重要性和實(shí)用性。
酸性肉湯(GB):微生物檢測(cè)中的重要工具酸性肉湯是一種專門用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)的培養(yǎng)基。其成分包括多價(jià)蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖和磷酸二氫鉀,這些成分共同為微生物提供了適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。配方與制備酸性肉湯的典型配方如下(每升):多價(jià)蛋白胨:5.0g酵母浸粉:5.0g葡萄糖:5.0g磷酸二氫鉀:5.0gpH值:5.0±0.2(25℃)制備方法為:稱取20.0g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水中,加熱煮沸溶解,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。注意勿過分加熱。檢驗(yàn)原理多價(jià)蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀為緩沖劑;較低的pH適合在酸性中生存的微生物生長(zhǎng)。應(yīng)用酸性肉湯主要用于酸性罐頭食品的商業(yè)無菌檢驗(yàn)。在檢驗(yàn)過程中,酸性肉湯可以幫助檢測(cè)食品中是否存在微生物生長(zhǎng),從而判斷食品是否達(dá)到商業(yè)無菌的要求。質(zhì)量控制按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置30±1℃需氧培養(yǎng)96小時(shí):蠟樣芽孢桿菌(CMCC(B)63303):生長(zhǎng)良好,濁度2。大腸埃希氏菌(ATCC 25922):生長(zhǎng)良好,濁度2??莶菅挎邨U菌(ATCC 6633):生長(zhǎng)良好,濁度2。注意事項(xiàng)稱量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基具有高靈敏度和特異性,能夠有效抑制其他非目標(biāo)菌的生長(zhǎng),減少誤判的可能性。
在微生物培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的物理性質(zhì)直接影響實(shí)驗(yàn)的操作和觀察效果。改良CCD瓊脂基礎(chǔ)在物理性質(zhì)上進(jìn)行了好的改進(jìn),使其更加適合實(shí)驗(yàn)室操作和微生物生長(zhǎng)。例如,改良后的瓊脂基礎(chǔ)具有更好的凝固性和穩(wěn)定性,能夠在較寬的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài),從而為微生物提供穩(wěn)定的生長(zhǎng)平臺(tái)。同時(shí),其透明度的提高使得觀察微生物的生長(zhǎng)情況變得更加直觀和方便。此外,改良CCD瓊脂基礎(chǔ)還具有良好的可操作性,易于分裝和滅菌,減少了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作的時(shí)間和精力。這些物理性質(zhì)的改進(jìn)不僅提升了實(shí)驗(yàn)的便捷性,還提高了實(shí)驗(yàn)的整體效率。乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽鹽和溴甲酚紫。蛋白胨提供碳源和氮源,支持細(xì)菌生長(zhǎng)。2216E瓊脂培養(yǎng)皿
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的配方優(yōu)化,使其在制備和使用過程中操作簡(jiǎn)便,且保存條件寬松(2-8℃避光保存)。25%甘油硝酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基:微生物檢測(cè)的高效工具溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基(Bromocresol Purple Glucose Peptone Water Broth,簡(jiǎn)稱BGBM)是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)領(lǐng)域的培養(yǎng)基,特別適用于壓力蒸汽消毒過程監(jiān)測(cè)指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養(yǎng)及消毒效果測(cè)定。制備方法:稱取15.0g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水或去離子水中。加熱攪拌至完全溶解。分裝試管,115℃高壓滅菌30分鐘,備用。檢驗(yàn)原理蛋白胨提供氮源、碳源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖是可發(fā)酵糖類;溴甲酚紫作為pH指示劑,通過顏色變化反映培養(yǎng)基中pH的變化。應(yīng)用BGBM培養(yǎng)基主要用于:壓力蒸汽消毒過程監(jiān)測(cè)指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養(yǎng)及消毒效果測(cè)定。牛奶中抗生物質(zhì)生物抑制法快速檢測(cè)試劑盒的研發(fā)研究。質(zhì)量控制按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置56±1℃需氧培養(yǎng)48小時(shí):嗜熱脂肪桿菌芽孢(Bacillus stearothermophilus):生長(zhǎng)良好。注意事項(xiàng)制備時(shí)需確保培養(yǎng)基完全溶解,避免結(jié)塊。滅菌后需冷卻至室溫后使用,以避免高溫對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的破壞。使用時(shí)需注意無菌操作,避免污染。BGBM培養(yǎng)基因其營(yíng)養(yǎng)豐富、制備方便和應(yīng)用廣,已成為微生物檢測(cè)中的重要工具。25%甘油硝酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿