CASA,即計(jì)算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測(cè),CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng),以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過(guò)相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子,適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡,更多精子樣本有助于分類(lèi)和變異性的分析。國(guó)內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個(gè)精子,結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí),需精確測(cè)量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過(guò)活力評(píng)估。對(duì)于碎片過(guò)多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語(yǔ),如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),擺動(dòng)性(WOB)?:實(shí)際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動(dòng)值。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):1、精漿果糖測(cè)定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】(1)精液果糖為0,可見(jiàn)于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見(jiàn)于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測(cè)定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見(jiàn)于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見(jiàn)于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測(cè)是法醫(yī)鑒定有無(wú)精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測(cè)定【正常參考值】36.72±21.43U/L?!九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測(cè)定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對(duì)活性:≥0.426?!九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測(cè)可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時(shí)無(wú)LDH-X形成,少精或無(wú)精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開(kāi)始檢測(cè)時(shí)的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。
ivos自動(dòng)精子分析系統(tǒng)hamiltonthorne的casa系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)??梢詰?yīng)用于包括人類(lèi)、公牛、馬、、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚(yú)以及各種瀕危動(dòng)物。全自動(dòng)的ivos可以提供快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出。可以使用一次性的和可重復(fù)的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級(jí)。ivos能提供:、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果高速分析,在60hz下半秒掃描30幀為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。高等級(jí)數(shù)據(jù)安全。(順應(yīng)美國(guó)fda的操作軟件)數(shù)據(jù)結(jié)果包括:計(jì)數(shù)、濃度。運(yùn)動(dòng)以及前進(jìn)運(yùn)動(dòng)三種速度參數(shù)vap,vsl和vcl,外加運(yùn)動(dòng)參數(shù)lin,alh,str和bcf。內(nèi)置質(zhì)控保證分析精度可以回放精子活動(dòng),標(biāo)記不同狀態(tài)精子。迅速根據(jù)新的設(shè)定對(duì)上次分析結(jié)果進(jìn)行重新計(jì)算,此過(guò)程不會(huì)損失畫(huà)面。形態(tài)可選附件:三維嚴(yán)謹(jǐn)形態(tài)(人類(lèi)):的經(jīng)過(guò)認(rèn)證的嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男螒B(tài)分析。用戶自定義形態(tài)。即時(shí)形態(tài)分析熒光可選附件:自定義熒光(只有ivos)可以用濾光片的casa系統(tǒng)。高精度的計(jì)數(shù)。同時(shí)在氙氣燈析運(yùn)動(dòng)和靜止,使用各種熒光染色,自動(dòng)探測(cè)計(jì)數(shù)染色細(xì)胞,自動(dòng)歸類(lèi),可選彩色攝像頭。
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):5、精漿肉堿測(cè)定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L。【臨床意義】精漿肉堿測(cè)定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時(shí)所需的能量來(lái)源有關(guān)?,F(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說(shuō)明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測(cè)定【正常參考值】陰性?!九R床意義】AsAb檢測(cè)對(duì)不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動(dòng),干擾精子的運(yùn)行,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽(yáng)性者占25%-30%,當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時(shí),系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。精子分析儀節(jié)省時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。該設(shè)備還具備良好的售后服務(wù),Hamilton Thorne公司提供培訓(xùn)和技術(shù)支持,確保用戶能夠充分利用設(shè)備的功能。美國(guó)水生動(dòng)物精子分析DSL
計(jì)算機(jī)輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源
測(cè)定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計(jì)數(shù)和全自動(dòng)分析。1.顯微鏡計(jì)數(shù):這是傳統(tǒng)的測(cè)定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室中盡快進(jìn)行計(jì)數(shù)。應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下將精子進(jìn)行分類(lèi),這一步非常重要,因?yàn)橥暾木硬拍鼙挥?jì)數(shù)。然后,將剩余的精液樣本通過(guò)自然沉降或離心的方法讓精子下沉,通過(guò)顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗(yàn)和技巧,而且受到許多因素的影響,如精子的活動(dòng)性、濃度、形態(tài)等。2.全自動(dòng)分析:隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)在有全自動(dòng)的精子分析儀,可以快速準(zhǔn)確地測(cè)定精子密度和總數(shù)。這種方法通過(guò)激光技術(shù)進(jìn)行,可以測(cè)量大量精子,包括前向運(yùn)動(dòng)的精子。這些儀器通??梢蕴峁└_的結(jié)果,并且減少了人為錯(cuò)誤。在進(jìn)行精子計(jì)數(shù)前,男性應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間禁欲,因?yàn)檫@可能會(huì)影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時(shí),健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源