從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞,研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標(biāo)記法純化臍血中的CD133+細(xì)胞,通過(guò)流式細(xì)胞儀,免疫細(xì)胞化學(xué),免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(xué)(光鏡,電鏡)觀察研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞;將細(xì)胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細(xì)胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞的生長(zhǎng)特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽(yáng)性細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定CD133+細(xì)胞純度為75%-85%;將分離細(xì)胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細(xì)胞貼壁,7-10d可見(jiàn)貼壁細(xì)胞呈鋪路石樣排列;14d后細(xì)胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見(jiàn)***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見(jiàn)胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測(cè)貼壁細(xì)胞培養(yǎng)14d后細(xì)胞表面抗原表達(dá)情況:與培養(yǎng)開(kāi)始時(shí)相比,祖細(xì)胞標(biāo)志CD133和CD34陽(yáng)性率呈明顯下降趨勢(shì),分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志Flk-1表達(dá)明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時(shí)vWF抗原呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),陽(yáng)性率為(77.9±3.3)%.人骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨間充質(zhì)祖細(xì)胞的免疫磁珠分選和鑒定。廣東protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專(zhuān)一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。當(dāng)用預(yù)先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來(lái)。再通過(guò)蛋白變性分離，對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè)，進(jìn)而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的，符合體內(nèi)實(shí)際情況，得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合；也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。上海anti-Flag COIP免疫磁珠哪家好BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。

免疫磁珠分離羊水來(lái)源OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞的可行性.方法 采用免疫磁珠細(xì)胞分選法去除羊水細(xì)胞中CD44和SSEA4陽(yáng)性細(xì)胞,使OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)特性,免疫熒光染色計(jì)算OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞得率,Real-TimePCR比較分離前后OCT-4表達(dá)量的差異,免疫組化檢測(cè)NANOG,AKP,MAP-2,NGFR和Myosin等細(xì)胞因子的表達(dá).結(jié)果 經(jīng)免疫磁珠分離的細(xì)胞接種12h內(nèi)貼壁生長(zhǎng),形態(tài)呈梭形,部分呈多角形,融合后形成輻射狀排列.免疫熒光染色OCT-4陽(yáng)性細(xì)胞得率為(90.15±8.25)%,Real-TimePCR檢測(cè)結(jié)果顯示分離后細(xì)胞OCT-4的表達(dá)量較未分離細(xì)胞和MSC有***性差異(P<0.01).原代培養(yǎng)可獲得(1～2)×107個(gè)細(xì)胞,3代可獲得(2～4)×108個(gè)細(xì)胞,傳至10代以后細(xì)胞的增殖能力下降.免疫組化結(jié)果顯示OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞表達(dá)NANOG,AKP,MAP-2和NGFR等細(xì)胞因子.結(jié)論 免疫磁珠細(xì)胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽(yáng)性的胎兒干細(xì)胞,分離后的細(xì)胞保持干細(xì)胞原有特性及生物學(xué)特征,可作為組織工程種子細(xì)胞.

常見(jiàn)問(wèn)題及對(duì)策

3： 如何避免磁珠在儲(chǔ)存或使用過(guò)程中可能出現(xiàn)的聚集情況？

磁珠應(yīng)保存在2～8℃，使用時(shí)應(yīng)避免由于污染而導(dǎo)致的不可逆聚 集，或因干燥而導(dǎo)致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬 于正常現(xiàn)象，不影響磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑（如NP-40、 Tween-20 或 Triton X-100）可有效防止磁珠聚集。經(jīng)過(guò)低pH洗脫操 作的磁珠可以用結(jié)合緩沖液洗滌至中性，然后用含有0.1% (v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠，并用超聲波水浴 處理2min，即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài)，以上處理均不影響磁珠的抗體 結(jié)合效率。

4： 如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象？

建議使用低吸附率的耗材進(jìn)行磁珠操作。另外，在緩沖液中添加 0.01%～0.1%(v/v)的非離子型去垢劑（如NP-40、Tween-20或 Triton X-100）可以有效降低磁珠對(duì)耗材的粘附。

BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠蛋白相互作用。

免疫磁珠（Immunomagneticbead,IMB）技術(shù)是20世紀(jì)80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。以免疫學(xué)為基礎(chǔ)，滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化及分子遺傳學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域，其在免疫檢測(cè)、細(xì)胞分離、生物大分子純化和分子生物學(xué)等方面有著越來(lái)越***的使用。免疫磁珠的結(jié)構(gòu)：磁珠是由**金屬顆粒（Fe2O3,Fe3O4）,**外層包裹的高分子材料（如聚苯乙烯、聚氯乙烯）和**外層的功能配基（如-NH2，-COOH、-OH、-CHO）組成。免疫磁珠在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用：1.細(xì)胞分選，2.蛋白質(zhì)/抗體分離與純化。3.核酸分離純化核酸結(jié)合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。4.免疫檢測(cè)免疫磁珠由于粒徑小，比表面積大，可捕獲較多的待測(cè)物，并直接在其表面進(jìn)行酶顯色、熒光或同位素顯示，從而建立了一系列檢測(cè)速度快、特異性高、靈敏度高和重復(fù)性好的免疫檢測(cè)方法。BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠全國(guó)招商代理。河南COIP免疫磁珠銷(xiāo)售

免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。廣東protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商

分離轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細(xì)胞.運(yùn)用針對(duì)小鼠干細(xì)胞表面特異表達(dá)的干細(xì)胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細(xì)胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)(FACS)檢測(cè)MACS分離后骨髓細(xì)胞中干細(xì)胞(Sca-1陽(yáng)性細(xì)胞)比例,監(jiān)測(cè)細(xì)胞分選效果.結(jié)果顯示MACS分離后骨髓細(xì)胞中Sca-1陽(yáng)性細(xì)胞所占比例達(dá)85%以上,涂片觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞組成和細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征與FACS所得結(jié)果一致.MACS可以從轉(zhuǎn)基因小鼠全骨髓細(xì)胞中分離出Sca-1陽(yáng)性的骨髓造血干細(xì)胞,細(xì)胞純度可達(dá)85%以上.廣東protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商

上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)粚?shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷(xiāo)售；計(jì)算機(jī)軟件開(kāi)發(fā)；計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程；從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的公司，是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售為一體的專(zhuān)業(yè)化公司。普平生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專(zhuān)業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì)，以高度的專(zhuān)注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn)，科研項(xiàng)目。普平生物不斷開(kāi)拓創(chuàng)新，追求出色，以技術(shù)為先導(dǎo)，以產(chǎn)品為平臺(tái)，以應(yīng)用為重點(diǎn)，以服務(wù)為保證，不斷為客戶創(chuàng)造更高價(jià)值，提供更優(yōu)服務(wù)。普平生物創(chuàng)始人閆冰，始終關(guān)注客戶，創(chuàng)新科技，竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。