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廣東anti-Myc COIP免疫磁珠市場報價

來源: 發(fā)布時間:2022-03-15

COIP實驗步驟
第三步:免疫共沉淀
根據(jù)不同的抗體結(jié)合方式,這里的免疫共沉淀步驟會稍有不同,但是本質(zhì)是一樣的,都是為了形成抗原-蛋白復合物。
如果直接使用 Protein A/G 結(jié)合的 beads,先進行細胞裂解液/蛋白混合物與抗體的孵育,再加入 beads 將蛋白-抗體復合物拉下來。
如果使用了交聯(lián)劑將抗體與 Protein A/G 固定,或者直接將抗體固定在 beads,則將固定抗體的 beads 與細胞裂解液或則蛋白混合物一起孵育。
增加在洗脫之前的洗滌次數(shù)或在免疫共沉淀緩沖液中加入 Triton X-100 ,可以降低非特異性結(jié)合,以防止蛋白在陰性對照樹脂實驗樣品中被檢測到。
第四步:洗脫與檢測
***一步則是使用洗脫緩沖液將互作蛋白復合物洗脫,并通過 Western Blot 或者 Mass spectra 檢測鑒定蛋白。當?shù)鞍谆蚩贵w對低 pH 的緩沖液敏感,可使用中性 pH 值的洗脫緩沖液。
注意事項:
如后續(xù)需進行酶活或功能性分析,則需使用兼容下游檢測的 Elution buffer 進行洗脫。
對于交聯(lián)劑結(jié)合的 beads,為了保持抗體偶聯(lián)樹脂的活性,應立即再生和存儲樹脂,保證抗體可以重復利用。
應用免疫磁珠分離法純化弓形蟲速殖子的研究。廣東anti-Myc COIP免疫磁珠市場報價

磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結(jié)合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術對單增李斯特菌進行分離鑒定的檢測方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測提供一種快速,高效和靈敏的檢測新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設計正交試驗,摸索pH,溫度,時間對氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設計不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時間,偶聯(lián)溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件,運用制備的免疫磁珠對樣品中的單增李斯特菌進行捕獲,并與顯色平板結(jié)合試驗,鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.湖北anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起B(yǎng)EENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。

戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質(zhì)量鑒定結(jié)果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內(nèi)及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.

羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養(yǎng)分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養(yǎng)9~14d,CD34+細胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.免疫磁珠技術應用于肺Cancer中的研究進展。

建立有效的人類神經(jīng)干細胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細胞懸液,用磁性微珠標記的CD133單克隆抗體與細胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細胞,通過體外培養(yǎng)并誘導分化,觀察CD133陽性細胞和陰性細胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細胞占胚胎腦組織細胞的2%左右,該細胞體外擴增能力強,細胞呈球形生長,并易聚集成團,培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進行活細胞計數(shù),細胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導分化后的細胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細胞,陰性細胞擴增能力弱,活細胞計數(shù)以死細胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細胞在體外能進一步培養(yǎng)擴增并分化.免疫磁珠法分離和純化胚胎神經(jīng)干細胞。浙江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制

免疫磁珠法富集循環(huán)腫瘤細胞研究進展。廣東anti-Myc COIP免疫磁珠市場報價

抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結(jié)果進行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細胞株,其中1F12細胞株分泌的抗體效價、相對親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價為106,相對親和力為0.2mg/L,與FITC標記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標記的蛋白。應用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應用于免疫檢測分析的價值。廣東anti-Myc COIP免疫磁珠市場報價

上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領域內(nèi)的技術開發(fā)、技術咨詢、技術轉(zhuǎn)讓;實驗室設備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計算機軟件開發(fā);計算機網(wǎng)絡工程;從事貨物及技術進出口業(yè)務。 的公司,是一家集研發(fā)、設計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。普平生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目。普平生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術為先導,以產(chǎn)品為平臺,以應用為重點,以服務為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價值,提供更優(yōu)服務。普平生物始終關注自身,在風云變化的時代,對自身的建設毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使普平生物在行業(yè)的從容而自信。

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