應(yīng)用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標(biāo)記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)及生長情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型,并檢測細(xì)胞體外多向分化能力.結(jié)果應(yīng)用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細(xì)胞可獲得乳牙牙髓干細(xì)胞,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理證明看其生長速度慢于牙髓細(xì)胞,細(xì)胞表型分析證實CD29,CD105高表達(dá),CD34,CD45低表達(dá).礦化誘導(dǎo)和成脂誘導(dǎo)證實STRO-1+乳牙牙髓細(xì)胞具有干細(xì)胞多向分化的能力.結(jié)論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細(xì)胞的方法.所分離的細(xì)胞具有干細(xì)胞的表型特點及多向分化能力.BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠蛋白相互作用。浙江anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
實驗優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術(shù)對金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測提供基礎(chǔ).利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對其捕獲.結(jié)合平板菌落計數(shù),考察包被磁珠時多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時間等因素對捕獲效率的影響.在單因素實驗基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實驗,并對該方法的靈敏度,特異性及其在食品中的應(yīng)用效果初步探索.結(jié)果表明,比較好捕獲條件為抗體加入量30μL,免疫磁珠加入量80μL,捕獲時間45min,在此條件下捕獲效率均超過30%,該方法捕獲限可達(dá)到101CFU/mL,特異性良好,并初步用于羊肉卷洗水中金黃色葡萄球菌的快速分離,捕獲時間小于1h.免疫磁分離作為一種快速的分離篩選方法,可用于食源性金黃色葡萄球菌的快速分離.浙江anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起免疫磁珠法分離和純化胚胎神經(jīng)干細(xì)胞。
常見問題及對策
3: 如何避免磁珠在儲存或使用過程中可能出現(xiàn)的聚集情況?
磁珠應(yīng)保存在2~8℃,使用時應(yīng)避免由于污染而導(dǎo)致的不可逆聚 集,或因干燥而導(dǎo)致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬 于正?,F(xiàn)象,不影響磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、 Tween-20 或 Triton X-100)可有效防止磁珠聚集。經(jīng)過低pH洗脫操 作的磁珠可以用結(jié)合緩沖液洗滌至中性,然后用含有0.1% (v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠,并用超聲波水浴 處理2min,即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài),以上處理均不影響磁珠的抗體 結(jié)合效率。
4: 如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象?
建議使用低吸附率的耗材進(jìn)行磁珠操作。另外,在緩沖液中添加 0.01%~0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或 Triton X-100)可以有效降低磁珠對耗材的粘附。
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,通過剪切、消化和吹打成單細(xì)胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞球,取第3代進(jìn)行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細(xì)胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細(xì)胞及分化后細(xì)胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細(xì)胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞球,有較強(qiáng)的增殖能力,干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細(xì)胞混雜牛長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細(xì)胞中分離出只占極少比例的**干細(xì)胞,細(xì)胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進(jìn)一步證實了**干細(xì)胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ).BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。
一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測的方法及測試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測的方法是:利用免疫學(xué)反應(yīng)夾心法,競爭法以及間接法檢測不同物質(zhì)的存在,并在測試板上設(shè)置對照體系:測試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準(zhǔn)確,不受光學(xué)因素干擾,磁信號穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡單,穩(wěn)定,低廉,檢測快速,適合現(xiàn)場檢測等特點.人骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨間充質(zhì)祖細(xì)胞的免疫磁珠分選和鑒定。湖北protein A/G COIP免疫磁珠性能
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人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細(xì)胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學(xué)特性.方法:留取人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤新鮮標(biāo)本,分離獲得腦腫瘤細(xì)胞.應(yīng)用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細(xì)胞儀檢測分選陽性率;神經(jīng)球計數(shù)法分析CD133+/-亞群細(xì)胞神經(jīng)球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細(xì)胞表面神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)標(biāo)記物CD133,神經(jīng)巢蛋白(nestin)表達(dá)情況;檢測CD133+/-亞群細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后細(xì)胞表面分化標(biāo)記物β-TubulinⅢ,GFAP表達(dá)情況.結(jié)果:CD133+亞群細(xì)胞具有干細(xì)胞特性,可形成明顯的神經(jīng)球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標(biāo)記物CD133,nestin表達(dá)陽性,經(jīng)誘導(dǎo)分化后分化標(biāo)記物β-TubulinⅢ,GFAP表達(dá)陽性;CD133-亞群細(xì)胞無上述特性.結(jié)論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細(xì)胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.浙江anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
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