流式細胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射，操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質(zhì)的定量檢測，目前該儀器已商品化。必須慎重分析得到的是否是外泌體。吉林外泌體circRNA測序

外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào)，進一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關(guān)。體液外泌體脂質(zhì)組學外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。

外泌體的組成較為復雜，其內(nèi)含有多種生物大分子，如：核酸（雙鏈DNA和各種RNA亞型）、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進入血液循環(huán)，而后被靶細胞吸收，從而調(diào)節(jié)靶細胞基因表達和細胞功能。此外，外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子，調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達，參與細胞分化、細胞凋亡及細胞信號的傳導。有研究表明，外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強種瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進而促進種瘤的發(fā)展。

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體，如樹突狀細胞、淋巴細胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。

外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能。作為細胞間信號傳導的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍，但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù)，關(guān)于需要改進的課題存在很多。例如，外泌體提純方法中，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)，給后續(xù)實驗產(chǎn)生了許多障礙?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體，無法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問題所在。而免疫印跡法（WB）和Elisa檢測法作為被普遍應用的外泌體檢測的一般方法，又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標記蛋白。確認外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制，通過促進或壓制釋放機制。江蘇外泌體label free

結(jié)果表明，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。吉林外泌體circRNA測序

與干細胞不同的是：干細胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應，但它可以通過改變細胞外基質(zhì)，改變受體細胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，來調(diào)節(jié)細胞凋亡，生長，增殖和分化途徑。因此，干細胞外泌體具有減少細胞凋亡、減輕炎癥反應、促進血管生成、抑制纖維化、提高組織修復潛力等重要生物學功能，在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應用前景。干細胞外泌體的優(yōu)點，體積?。杭{米級粒子，大小約為細胞的1/200，因此能很好地被人體所利用。免疫反應程度低：外泌體不是細胞，只作為載具，外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原，免疫系統(tǒng)難識別，對人體影響小?？纱┩秆X障壁：體積小加上脂質(zhì)外膜的特性，使其可以通過血腦障壁，抵達腦部組織。吉林外泌體circRNA測序